反相分配色谱概念
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/07/09 04:34:09
在液-固吸附色谱,液-液分配色谱这两种液相色谱中才涉及到正相色谱及反相色谱.液-固吸附色谱(固定相是固体吸附剂,它是根据物质在固定相是吸附作用差异来分离的.吸附作用越强,K值越大,保留时间越长)液-液
能使中性化合物和极性化合物在一根色谱柱中得到分离.适用于多种基体中的多类不同性质化合物的测定和分离.保留时间可以用分子的疏水性进行描述和解释.所用高纯度的水、甲醇和乙腈等溶剂价格便宜、实用.选择性可通
色谱柱填料可以由基质直接构成,如硅胶、氧化铝、高交联度的苯乙烯-二乙烯苯或者甲基丙烯酸酯等等;也可以在这些基质的基础上涂布或化学键合固定液来构成,如:最经典的各种ODS柱、氨基柱、氰基柱等.硅胶主要通
操作上是一样的,使用的柱子和流动相不同,再就是正、反相切换的时候要记得洗流路.
反相色谱主要是以水等极性物质作为流动相,按相似相容原理,出峰先后是从极性强的到极性弱的;而正相色谱的流动相大多为非极性物质,出峰先后则是从弱极性的到强极性的.
在反相液相色谱中,固定相的极性小于流动相,洗脱顺序取决于溶质分子的疏水性,疏水性强的保留时间长!
反相一般是一些极性较弱的物质的,因为这些物质在反相柱子上保留较好.因此测弱极性的效果比正向测的好
色谱优化的具体条件与优化的目的有关,一般比较容易改变的便是流动相的优化了.建议你去“色谱世界”网站看看,非常专业,会对你有很大帮助.
应该是不能除去的,mobilephase和sample始终是有差异的.
极性越大,速度越快
反相柱一般极性大的先出,从结构上分析奈的极性要小些,从理论分析是联苯先出.
这个东西不一定吧,最直观的是看固定相和流动相的极性差异,另外也要看你想要实现拆分的物质极性与固定相和流动相的极性差异.在忽略掉空间结构的前提下,主要依靠极性大小导致相互作用能差,进而实现有效拆分.但是
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反相还是正相,是根据流动相相对于固定相的极性而言的.流动相极性强于固定相的,称作反相色谱;流动相极性弱于固定相的,称作正相色谱. 反相色谱流动相的极性强,容易带着极性分子走,而留下非极性分子.这主要
根据样品的极性分的,正相色谱:固定相极性大于流动相极性反相色谱:固定相极性小于流动相极性
这个溶剂系统一般比列是4:1:5,为醇性溶剂,在用纸色谱中作为展开剂时,主要根据的是分配作用原理进行分离,相当于正相色谱,在糖的鉴别中,极性越大,Rf越小,Rf:单糖>双糖.
色谱柱的安装:1、首先应确认柱和仪器的接头以及管路是否匹配.为减少死体积,进样阀、柱子、检测器之间的连接管路内径尽可能使用内径较小的管线,同时控制进样器、色谱柱和检测器之间连接管线的长度.安装色谱柱之
反相柱用于大多数HPLC分析,主要用来做含量分析.正相柱主要用于分离手性化合物,主要用于测试ee值,dr值等.前者流动相一般为与水混溶的溶剂,如水-甲醇,乙腈,甚至加入无机盐配成缓冲溶液,而后者往往用
高效液相色谱法包括正相高效液相色谱法和反相高效液相色谱法.正相高效液相色谱法中流动相的极性小于固定相的极性,也就是以及性键合相为固定相(常以氨基、氰基键合相等作为固定相).反相高效液相色谱法中流动相的
问题提的很笼统,所以我也只能大概回答,希望对你有用.常规的办法,如果未基线分离,或者出现肩峰,可以尝试降低流速,看看是否能分开.如果分离效果很不好,则需要调整流动相梯度,减缓流动相梯度变化率.如果目标