基因工程中切割并缝合目的基因与质粒为什么是同种酶
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/10/06 12:16:31
理论上这样,其实不是只要能录出相同的粘性末端就行了……举个例子,CGATG,CGAT这两个不同但能又相同的粘性末端第一个一般且目的基因第二个一般切质粒
是这样的,一般我们用两个检测标准第一个是标记基因,用来检测是否运载体进入到受体细胞里面.例子:运载体里面带有一个抵抗抗生素的基因.那么把所有受体细胞(比如,大肠杆菌)撒在培养皿上之后,培养皿中有抗生素
识别序列有区别--G↓GATCC--限制酶1,2都可以切,但是--↓GATC--只能有酶2切.懂了么,就是说酶一要识别出6个碱基这样的排序才能切,但是酶二只需要识别出4个这样的排序,酶二的选择性比较低
分子杂交就是指DNA,RNA或蛋白分子杂交,可以是Southern,Northern,或Werstern杂交.检测转录,应该是Northern杂交啦.核酸杂交就是指DNA或RNA杂交啦,可以使Sout
目的基因一般是受体细胞不具有的,受体细胞基因缺陷的例外,运载体一般是环状DNA,具有标记基因,至少有两对启动子,切割点也不能少,受体细胞没有什么限制,动物细胞用显微注射技术,植物细胞采用农杆菌转化法,
基因是DNA片段,目的基因的获取当然是切开DNA
基因工程中,用到最多的还是单细胞的细菌.把将目的基因同载体连接后导入到细胞后,就可以一代代遗传下去了.再问:遗传的时候是把整个质粒给遗传下去还是把里面的基因和原来的染色体结合,再遗传给后代!再答:一般
你说的这种情况不是不会出现,但与用同一种酶同时目的基因与运载体相比,个自相连的机会大大降低了,应该还是用不同的酶切要好一些.
“两条目的基因的1处粘性末端不也可以链接吗?”,当然存在这种可能性.但用两种限制性内切酶切割最主要的目的是防止载体切割后的自连,几率不但大,而且可以产生克隆,大量的自连会影响挑选重组的克隆.
识别序列有区别--G↓GATCC--限制酶1,2都可以切,但是--↓GATC--只能有酶2切.懂了么,就是说酶一要识别出6个碱基这样的排序才能切,但是酶二只需要识别出4个这样的排序,酶二的选择性比较低
从试验经验角度讲:“获得目的基因”通常包括PCR这个步骤,因为“获得目的基因”的后续试验,一般都需要大量的目的基因作为实验材料.从字面或语义来讲:基因工程中“获得目的基因”是指,所有可以从样品中分离得
一楼说的是真核细胞的基因工程过程,如果是原核细胞的话,是将目的基因先与质粒结合再导入受体细胞,这样就可以借助质粒的自我复制机表达特性翻译出蛋白质了.附:许多细菌除了拟核中的DNA外,还有大量很小的环状
逆转录法人工合成法基因库法直接从生物上提取人工合成法不常用,因为现在的技术还不够完善,现在最能合成几百个核苷酸组成的核苷酸链逆转录法,目的性强,可以快速精确的找到需要的基因,经常和其他方法并用.基因库
当然最好是同种酶,最好是产生同样的粘性末端.再问:有没有用两种限制酶的情况?再答:有啊,两端用两种酶,这样更特异。
就是找到互补的碱基对再问:正向与反向的区别在哪儿呢?再答:不要在意细节
好吧之前弄错了一般情况下,要把目的基因连接,需要用同一种或同两种限制性内切酶酶切质粒和目的基因.在本题中,酶II的识别序列是酶I识别序列的一部分,如果质粒用酶II处理,那么在geneI和II区都会被切
应该选用有相同的切点的运载体再问:这是前提吗?再答:是条件,否则不可能成功
建议看看书这不好说
目的基因:在基因工程设计和操作中,被用于基因重组、改变受体细胞性状和获得预期表达产物的基因.目的基因一般是结构基因(或调控因子),也就是能转录和翻译出多肽或蛋白质的基因.目的基因与运载体结合的目的:使
不是切割吧,获取目的基因一般是PCR法,获取哪一段片段在PCR的时候就已经确定了,不是酶切之后确定的.大部分情况下,除非特殊实验的需要(转录因子的确定等,细节略了,否则获取目的基因不需要非编码区.非编