如果重组质粒不能在含四环素的培养基上生存,如何筛选重组质粒
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/07/16 14:04:10
限制酶切青霉素抗性基因并导入目的基因后就已经将青霉素的抗性基因破坏了,该受体细胞就不能抗青霉素了,只能在含四环素的培养基上生长.再问:难道抗性不是抑制生长吗,我一直是这样理解的~~再答:这里的抗性是抗
A、目的基因是B一珠蛋白基因,可以用反转录技术获得,即从小鼠特定细胞中提取mRNA作为模板,逆转录形成目的基因,A正确;B、用含抗四环素基因的质粒构建基因表达载体,其中四环素作用标记基因,以便筛选重组
一般有两种方法,一是用目的基因的特异性引物以重组质粒为模板,进行PCR扩增.看能否出现目的基因的扩增产物.还有一种是将纯化的质粒进行酶切,因为目的基因连接到载体质粒上时两边都带有人工添加的酶切位点,只
可以你只要把你的目标基因插入到这个载体中(双酶切将会获得高频率的阳性转化子),你的目标基因便会与抗四环素基因成为连锁状态.这样筛选到了抗四环素菌株,也就筛选到了你的目的基因了.这就是标记基因的作用.楼
注意一个问题,限制性核算内切酶识别的序列必然是一段回文序列,而不是随便的一个序列.回文序列的简单意思是在这段序列从3'到5‘读出的序列都是相同的.所以根据酶的专一性,只能用同种酶才可切出同种末端.
对呀如果将细胞涂在汗抗生素的板子上(或者培养基中),不含抗性基因的细胞就会被杀死,如果细胞成功的转染了质粒,得到了那个抗性基因,那么就不会被杀死,这个是最常用的筛选方法
我看是要用氨苄霉素进行筛选.楼主说的两点都对,所以因为第2点所说的原因,用四环素肯定会杀死你想要的细胞滴.至于第一点所担心的纯度问题,当然也是可能有某些细胞带有空质粒啦.这只能够靠前期插入(ligat
土壤农杆菌是用来侵染植物的,它主要含有一个叫Ti质粒的T-DNA片段,用土壤农杆菌中的Ti质粒作为运载体.把目的基因重组人Ti质粒上的T-DNA片段中,再将重组的T-DNA插入植物细胞的染色体DNA中
错误,可以筛选.具体解释如下:筛选标记基因有两个含义,一个是对菌用,目的是筛选出阳性的工程菌,这一基因是不会插入靶细胞(即动植物细胞等)DNA序列的.第二个则是存在于T-DNA区域,将会插入靶细胞DN
用一种限制性内切酶切割质粒和目的基因,加入DNA连接酶,形成重组DNA分子
这个就要看标志基因是在细菌质粒上,还是在目的基因上了.可能不同的教材,是从不同的角度出发的.
当然不能了卡那霉素对细胞是有一定毒性的而且转基因水稻胚芽细胞无卡那霉素抗性基因所以不能抵消毒性自然不能正常生长
能长出来.(高考不会去考这个基因能不能表达的问题的...)四环素对细胞有害,而有这个抗性基因,就可以抵抗危害,活下来.这样讲能理解吗?呃,我是过来人,高考不考抗性基因的概念,不用太深究.理解就行.
这两个作用都属于筛选,我们都知道基因工程中在插入目的基因的同时要插入标记基因,所谓标记基因,就是可以起到筛选作用的基因,可以翻译出相应的抗性蛋白质,只有细胞中翻译了这种蛋白质的才能在筛选培养基上生长(
原理是这样的: 质粒上有四环素抗性基因和氨苄青霉素抗性基因,如果将这样的质粒导入受体细胞中,则受体细胞既能在有四环素的培养基上生长,也能在含有氨苄青霉素的培养基上生长; 将目的基因插入到四环素抗性
基因表达载体的构建(即目的基因与运载体结合)是实施基因工程的第二步,也是基因工程的核心. 将目的基因与运载体结合的过程,实际上是不同来源的DNA重新组合的过程.如果以质粒作为运载体, 首先要用一定
需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶;两两组合会有目的基因目的基因组合,载体载体组合和目的基因与载体的组合三种.再答:你可能把一点忽略了,目的基因与目的基因末端一样所以可以组合,载体末端和载体末端一样,
筛选细胞的话是对的.但是转基因植物是不用标记基因筛选的,目的基因导入植物后,用分子杂交检验目的基因是否插入和表达,再将表达了的细胞(或组织)进行组织培养获得新植株.所以转基因植物是不用标记基因筛选的.
筛选已完成的重组载体说明大肠杆菌依然存在抗体.是楼主一时被误解.再问:û��
什么基因?什么质粒?正常情况不用这样做的一般做表达用的基因片段是需要测序鉴定的连T载体就是为了去测序,证实你扩增片段没有突变且是你需要的目的片段然后再去连接你的目的载体就ok了