干扰紫外吸收法测定核酸的含量实验的物质有哪些
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/08 14:02:02
核酸会吸收紫外光,所以蛋白质溶液中有核酸会有影响.但是测蛋白质溶液是一般会用260nm,因为核酸吸收最厉害在280nm.但是如果你要很准确,可以考虑用nuclease.
这个实验测定的是水杨酸的含量,而不是乙酰水杨酸,所以要加热,为的是使乙酰水杨酸充分水解成水杨酸,以便后面的实验测定
波长不同:蛋白在280nm,核酸在260nm.这取决于生色团,即分子结构.均一性不同:核酸的每种碱基都有吸收,而且相差不多,因而定量时线性很好;蛋白的20种构件中只有三种有吸收,相互差异也较大,所以蛋
在1.8~2.0间表示核酸较为纯净,没有大的蛋白质污染.ps:其实这种判断方法不是可靠的.分子克隆第三版专门提到过.
说明紫外吸收光谱在分析上有哪些应用.(1)紫外光谱可以用于有机化合物的定性分析,通过测定物质的最大吸收波长和吸光系数,或者将未知化合物的紫外吸收光谱
1.紫外分光光度计使用前要预热.2.比色皿应成套使用,注意保护,不能拿在光面上.3.离心机使用前必须将离心管平衡,对称放置.调速必须从低到高,离心完等转子完全停下后,再打开盖子,然后将转速打到最低.
你在利用UV测定之前,首先要做一个“OD280对蛋白质浓度”的一个标准曲线(工作曲线),这样从理论上,你可以通过OD值来换算出所测样品的蛋白质浓度,即所谓的真实值.但是任何方法都有缺陷,此处所用的标准
因为核酸在260nm处的光吸收比280nm更强,但蛋白质却恰恰相反,因此可利用280nm及260nm的吸收差来计算蛋白质的含量.常用下列经验公式计算:蛋白质浓度(mg/mL)=1.45A280-0.7
所有对260nm附近波长的紫外线有显著吸收的物质都会干扰紫外线吸收法测定核酸的含量实验.实验中主要是蛋白质.用苯酚-氯仿-异丙醇法纯化核酸样品可以去除蛋白质.
Folin酚法最好,准确度最高;双缩脲法最差,准确度最低;现很少用;考马斯亮蓝G250法介于两者之间.
紫外吸收法是以含有苯环的氨基酸为基础测量的,OD280值,各种蛋白含有的苯环的氨基酸数量不一定,所以只是大致估计.LowryProteinAssayKit福林酚蛋白浓度测定试剂盒\x05产品说明:在碱
1.工作曲线的绘制:分别取0、1.00mL、2.00mL、4.00mL、6.00mL、8.00mL、10.00mL、铁标准溶液(Fe0.01mg/mL)于7个50mL容量瓶中,加水至约20mL,加入0
好像是邻二氮菲?
A280/A260判断一下是否含核酸,含的话用经验公式蛋白质浓度=1.45×A280-0.74×A260(mg/ml)
我的更惨,220nm最大吸收,510无吸收,请问为什么?
最主要的考虑的是多糖类物质和蛋白的干扰
紫外光谱的含量计算时,吸收值会叠加的,所以,你在实验时,只要做个扣除样品的对照溶液,然后测出俩吸收值,那就可以计算了
核酸、核苷酸及其衍生物的分子结构中的嘌呤、嘧啶碱基具有共轭双健系统(-C=C一C=C一),能够强烈吸收250~280nm波长的紫外光.核酸(DNA,RNA)的最大紫外吸收值在260nm处.遵照Lamb
低含量用荧光吧!原子荧光应该更合适点,原子吸收要用氢化物发生器.用荧光或是氢化物发生器都可以朋友可以到行业内专业的网站进行交流学习!分析测试百科网这块做得不错,气相、液相、质谱、光谱、药物分析、化学分