提RNA枪头用DEPC水泡
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/10/05 22:36:53
DEPC即diethypyrocarbonate,中文名为焦碳酸二乙酯.分子式为C6H10O5,分子量为162.14.是一种强烈但不彻底的RNA酶抑制剂.通过和RNA酶的活性基团组氨酸的咪唑环结合使蛋
外源RNA酶处理一下超纯水就可以溶解RNA了.
需要烘干,严格讲还需高压,高压才能使DEPC分解.外源RNA酶清除剂,北京华越洋生物公司的,代替致癌物DEPC,无毒,使用远比DEPC操作简单.
DEPC是二乙基焦炭酸酯,它不可以加入含有巯基或一级氨基的溶液中,因为这些基团可以与DEPC发生反应(Berger,1975).不能用DEPC处理的最常用的缓冲液是Tris缓冲液,替代措施是先用DEP
DEPC泡过、灭菌烘干之后DEPC已经失活,所以,开封用过之后剩下的最好不要再用.当然,如果你泡过之后,DEPC没有灭菌失活,是可以放一段时间的,但是也不要超过1星期.
用灭菌DEPC水以保证没有RNAse降解你的模板RNA,不要用含有EDTA的buffer,包括TEbuffer.EDTA会络合掉镁离子,从而干扰PCR反应.
DEPC的活性的消灭RNA酶省的提的时候影响经过高压后它就没有活性了可以用DEPC水泡一些器皿消毒还可以用DEPC水配制溶液提RNA至于蒸馏水还是去离子水没必要联系吧担心的RNase
一切与提取RNA有关的液体试剂,必须用DEPC水配制,这是最基本的要求,因为RNA降解酶的分布太广了,无处不在,放不胜防啊
强烈就是指裂解速度比较快,不彻底就是不能全部抑制rna酶.
你的情况可能有两种可能:1.像二楼说的那样,在用酒精洗完沉淀后,干燥过程时间太长,导致RNA不好溶解.但这种情况可像你那样在水浴中加热溶解个10min,一般是会溶的.所以你的问题看起来更像是第二种情况
核酸(DNA和RNA)提取过程,最重要的是消除酶对核酸的降解.DNA有DNA酶,RNA有RNA酶.而焦碳酸二乙酯(DEPC)就是去除RNA酶(或者说使RNA酶失活),RNA酶是无处不在的,因此在RNA
如果你只抽的是一样的RNA,那就继续用呗,如果样品都是不一样的,那DEPC水被污染了必然你要重新配过呀.既然被污染了,以后做实验当然不能用了,做实验要严谨.再问:用枪头沾有RNA的枪头沾了一下DEPC
博凌科为-为你不可以,因为DEPC是一种强烈但不彻底的RNA酶抑制剂.它通过和RNA酶的活性基团组氨酸的咪唑环结合使蛋白质变性,从而抑制酶的活性.高压两次是无法除去RNA酶的,这样还是会存在RNA酶污
博凌科为-为你我们一般都是拿3%H2O2泡半小时,然后用冲洗DEPC水(泡过枪头的DEPC水高压后)冲洗后,甩干就可以用了.
DEPC(diethypyrocarbonate,焦碳酸二乙酯)处理过并经高温高压消毒的MiliQ纯水.DEPC水可以用于RNA沉淀的溶解,含有RNA的各种反应体系如反转录、siRNA的退火等,以及其
先配置DEPC水,1000ml双蒸水加1mlDEPC,不用灭菌.100%的乙醇与DEPC水按3:1的体积比配置;或者x%(x>75)的乙醇75ml,加DEPC水至xml.一段时间(一般12小时左右)后
无RNA酶灭菌水DEPC水:用将高温烘烤的玻璃瓶(180℃×2h)装蒸馏水,然后加入0.1%的DEPC(体积/体积),处理过夜后高压灭菌.DEPC水:泡实验器具的DEPC水的配制:1000ml双蒸水中
RNA自然分解也许受酸碱性影响,用的什么组织?
两个小时,不在4度也没问题的,放在超净工作台里再问:我看有的人都是放在4度过夜,这样会存在降解吗?再答:其实,如果你对RNA的质量要求不高的话,保证管子是去DNA酶的,在低温的情况下也应该是没问题的,
DEPC通过和RNA酶的活性基团组氨酸的咪唑环结合使蛋白质变性,从而抑制酶的活性