作业帮无血清培养基如何终止消化
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/08/29 02:10:14
消化完,离心细胞,含胰酶的上清去除,再用无血清培养液重悬细胞,即可.胰酶的浓度很低就没有效果了.
胰蛋白酶的酶切位点是肽链的Lys和Arg两个残疾的羧基端肽键,血清的加入可使酶饱和,严格上说不是竞争性抑制,因为血清蛋白不是抑制剂,还是底物!
培养基表面上用凡士林或石蜡封闭,使培养基与外界空气隔绝,让培养基本身成为无氧的环境,另一个办法是在培养基中加入还原性物质,降低培养基的氧化还原,
用胰蛋白酶处理细胞是让组织细胞分散开,成为单个细胞,至于用血清,则是为培养细胞提供营养的,可以采用替代品
血清中的营养物质丰富,而血浆中大多是细胞物质
血清终止的原理其实是竞争抑制.就是用过量的牛血清中含有的蛋白来和胰酶结合.不给胰酶消化细胞蛋白的机会.培养液中有什么一般没有关系,因为你消化无非是为了细胞传代,培养液终归是要弃去的.除非你要对培养液做
胰蛋白酶是一种丝氨酸蛋白酶,血清中含抗凝血酶Ⅲ,是一种丝氨酸蛋白酶抑制剂.因此血清可抑制对胰戴白酶的消化作用.而胰脂肪酶的催化部位主要由催化三联体组成,即组氨酸,色氨酸,天冬氨酸,我目前没有查到血清对
如果细胞长的慢可以用细胞生长因子
加入氢氧化钠终止反应,还有2,4二硝基苯肼中含Hcl,会使酶失活
血清培养液中有抑制胰蛋白酶酶活的因子
换成无血清培养基培养24h然后加药是为了让瓶内细胞处于同一细胞周期G0期,使药物作用于细胞同一状态.个人意见,仅供参考.
加氮源（硝酸盐或铵盐）矿质元素水维生素
最常用的就是使用胰蛋白酶抑制剂了,sigma公司就有（货号：T6522）,按照产品说明配制和使用即可.如果你培养的细胞对温度变化不敏感的话,也可以使用刚从四度冰箱拿出来的培养基终止,立即离心即可.这两
血清中的营养物质不能满足细胞的生长而且酸碱度不易控制平时加血清的作用是促进细胞生长
为什么无血清培养基养得好好的要加血清了呢血清的质量你检查过吗有无污染问题细胞从无血清到有血清也需要慢慢适应一下子营养太好了他也不习惯的
最好是半个月内吧,你加血清的培养基可以少配点,取45ml培养基在加5ml血清,放在灭菌好的50ml离心管里.用完的话在重新配也不麻烦.
细胞生长需要血清啊当然要加具体比例看细胞种类一般10-20%粉红也要加不过比DMEM加的少再问：为什么需要血清？再答：细胞生长需要血清。。。。再问：我想知道血清中的什么因素使细胞生长？再答：血清中的各
血清中含天然促生长因子,促进细胞贴壁,利于动物细胞培养.因为目前血清的一些成分还没被完全研究清楚,而这些成分对于动物胚胎细胞的生长有很重要的作用
因为血清中有的物质能把胰酶类似于中和掉.再问：什么意思？结合酶的活性中心？再答：具体的好像是由于血清含有非特异性胰蛋白酶抑制剂，就是抑制胰酶消化
在DEM/F12培养基添加酵母提取物和大豆水解物,配制无血清无蛋白培养基,分别在玻璃,PVB,和PS-TC培养面上培养vero细胞,观察生长情况,以含血清培养基BM为对照,结果与BM培养基进行比较.满