构建载体时,什么时候需要强启动子

用来构建载体的是一般是一些病毒的环形基因,用限制性核酸内切酶分别对该环形基因和目的基因进行切割,将切好的目的基因和环形基因通过DNA连接酶进行连接构成一个完整的基因,这个基因就是带有其他基因的重组基因

用限制酶切取目的基因,再用同一中限制酶切开质粒,用连接酶把目的基因和质粒连接起来.

而当某些病毒做运载体时,这些病毒具备逆转录能力,可以在逆转录酶的作用下,利用自身的RNA,逆转录出相应的DNA,且能使其与宿主细胞的DNA接到一起,并正常表达

copy到premier5.0设计出来的只是部分序列哦,无法表达的.需要把cDNA全长都设置进去,就是从起始密码子开始.再检查下你的表达载体有没有启动子这些元件.要表达一个基因考虑的东西挺多的哦,细心

原代培养,不分裂,或者生长缓慢的细胞,一般用慢病毒生长迅速的细胞系可用腺病毒（表达比较快)再问：我的细胞是小鼠心肌细胞株，非原代，3天左右传一次带，应该怎么选择呢？再答：慢病毒比较好再问：可是有些资料

PET28a作为一个成熟的商业载体,应该是比较好理解的!

大体分为一下几步：1.设计目的片段引物（含限制性酶切位点,要求：表达载体上有而目的片段上没有的酶切位点）2.PCR扩增片段3.扩增后的片段与pMD18/19T克隆载体连接,通过蓝白斑筛选,提质粒并酶切

建库的话随便找个T载体就可以了,只要方便测序就好,至于要实现原核表达的话我个人建议您还是在完成测序后将表达框分离（PCR也好、酶切也好）,连接到原核表达载体,我个人推荐使用IPTG诱导、含有组氨酸标签

你的构建策略很好,不需要用T载体.再问：为什么有的文章里面用到pMD18T这个载体呢？它是什么作用，我不太明白再答：　　pMD18T是个T载体。如果PCR产物直接双酶切效果不好，可以先把PCR产物放到

2．果树生物技术：在原有的传统果树遗传育种的基础上,引入生物技术手段,利用分子标记辅助育种,通过高效表达载体的构建、基因转化体系的建立和转基因技术的再问：还有别的么？

我估计这个构建是利用你提到的酶切位点在你所说的“特定启动子”和“终止子”之间插入目的基因,这样一来,如果构建成功,就会破坏了原来位于该“特定启动子”和“终止子”之间的四环素抗性基因,即“目的基因－载体

再答：应该是这个吧嘻嘻😄

说说它们的作用吧目的基因就是能够产生所需蛋白质的DNA片段,比如抗虫棉就是植入能产生抗虫蛋白的目的基因.启动子、终止子：启动子、终止子是目的基因DNA上特殊排序的碱基.RNA从启动子开始转录、翻译,到

启动子的作用是使转录过程开始部分质粒具有复制原点这一结构,作用是在此点处开始DNA的复制起始密码子的作用是开始翻译过程这三个名词分别代表了三个过程,即复制,转录,翻译如有疑问,欢迎追问；如果喜欢,欢迎

你的问题真的不知如何回答.超表达载体的构建：设计引物加接头,扩增目的基因,连接到T载体上测序.正确无误,切下来,酶切载体质粒与目的基因连接,阳性克隆鉴定,测序无误后构建完毕

在体外构建基因表达载体主要是指将目的基因与载体（一般以质粒居多）连接,形成的重组DNA才能导入大肠杆菌,它能在大肠杆菌细胞内复制和表达.用Ca2+处理,我学的是用Ca2+处理大肠杆菌的细胞壁,增大细胞

载体本身没有启动子.被拼接入载体的目的基因片段往往是不完整的,也就是说可能没有调节序列,也就是说没有启动子,所以为了保证产品有生物学活性,必须要人为的加上启动子.记不太清了,即使是有启动子的,也有可能

这个载体也是质粒,质粒是载体的本质,载体是质粒的名称载体的作用不仅仅是起到介导外源基因导入受体细胞的作用再问：可是我觉得载体要比质粒广泛啊，质粒只是一种DNA啊。。再答：细分的话：质粒是指游离于细菌基

和基因组的启动子一样的功能,没有启动子的话后面连的东西没法表达

5'UTR对于一些基因应该还是必要的,不过具体还是要看是什么基因,来自什么生物,而且还要看你的表达载体上面是不是有足够强的promoter或者enhancer,如果有,应该就没什么太大关系其他的答案我