梯度pcr怎么循环数设置
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/06 05:51:05
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梯度PCR其实就是把很多的PCR放在一起做,不用一次一次的作很多次可以很快的找出最适合的退火温度,或者说可以在最适合的退火温度下扩增出目的条带
一般情况下,循环30次产生的基因片段就够用了,在进行下去酶的活性可能也不会太好
进口梯度PCR仪你可以选择在香港中转到全国各地,这样进口的手续简单关税还不用那么高,我公司是走快件报关进口,在海关登记备案检查完后,用港车直接拉到深圳仓库,时间安全成本上都有绝对的优势,你公司只需要和
你的一对引物的TM值最好不要超过3℃,退火温度的一般比TM值低5℃,太低的退火温度会导致非特异性的扩增反应参数可以设为:94℃2m94℃30s}50℃30s}30cycles72℃30s}4℃∞若是无
打开软件-setup-advacedsetup-左手setup中第一行experimentproperties中有一项是whichreagentsdoyouwanttousetodetecttheta
是不同的管跑不同的温度呢?还是同一管跑梯度?如果不通的管子,就需要梯度pcr仪了,如果是一管,你可以设置在循环的时候,每循环一次温度递增或者递减0.5或者1度之内的.如果pcr连这个功能都没有,那你就
是反转录PCR么?如果是realtime的话应该可以确定是否到平台期吧?以参考文献来回答也是可以的.关键你要明白对方为什么问这件事.如果没有任何迹象表明你的实验结果不能很好支持你的结论的话,是不应该吸
梯度PCR多半是为第一次使用某条引物,为了摸索最佳退火条件设定的.拿到引物的时候,会得到建议的Tm值,两条引物不同,你可以换算出一个退火温度.但是这个退火温度不一定是最佳反应条件,所以可以设定退火的梯
现在普通pcr仪技术很成熟了,很多公司都有生产,技术指标很多但其实对使用者来说抓住以下3点就足够了,其余就是比比价格看看国产还是进口什么的.第一,控温模块材料.铝块的导热速率快,也是现在比较常用的模块
Biometra梯度PCR仪
对于一个PCR反应,虽然有各种各样的PCR仪引物设计软件或者经验公式计算最适的退火温度,可是由于模版中碱基的组合千变万化,对于特殊片断,经验公式得到的数据不一定能"P"出来结果,细微的变化对结果都可能
这个型号做不了梯度,只能是一个温度的.如果你有其他型号的,直接上他们的官网去下载对应型号机器的说明书,有详细说怎么设定梯度PCR温度的步骤.http://www.biometra.com/thermo
博凌科为-为你梯度PCR只是方便你寻找最佳PCR退火温度,可能减少你做PCR的次数和时间.使用时和楼上的兄弟说的一样,但有一点需要说明一下,就是你所设的温度梯度并不能象楼上的兄弟所说的那么简单,设温度
先用几个循环把退火温度降下来然后再固定那个温度跑20个循环呗再问:你这是降落PCR吧?再答:是要不同的管子放一起做梯度?循环数和普通的一样啊
貌似不能做温度梯度吧.
基因组做模板,最大的麻烦是特异性问题,特异性不好,杂带会比较多.有时引物设计的特异性比较好,常规pcr就基本搞定.建议你的模板量不要太大,在设置pcr条件时,先做5个稍高的退火温度,以扩增出更多的特异
两个策略:1.提高退火温度;2.降低镁离子浓度.如果还不行就两个同时进行.
你是做普通的PCR还是RT-CR,你用的是哪家的T酶,是卡他啦(音译的英文记不到了)还是thermal的,你说下我好给你说,要不只能给你一个常规的,
你设计的15分钟到25分钟的梯度部分实际上可以合并在一起.如果是自动进样的话,建议你在每个梯度的最后加上纯甲醇冲柱5分钟再20%水5分钟,或者只加20%水5分钟.单看你的梯度是可以用的,如果仪器不能运