沉淀DNA时为什么要用无水乙醇及高盐低温条件下进行
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/08 12:14:14
无水酒精和丙酮会使绿色褪去使实验失败所以不用
因为无论用哪种方法提取,沉淀DNA时总会加入高浓度的盐,加盐的目的是破坏能使蛋白质保持稳定的两个因素,使蛋白和DNA分离并沉淀下来.而此时盐的阳离子会与DNA结合形成DNA-阳离子盐溶于溶液中,再用无
乙醇对果胶有凝聚作用就是说果胶在一定浓度的乙醇溶液下的溶解度极低易析出还可除去一些有机杂质
二者没有什么本质区别.不过异丙醇沉淀效率高一些.用异丙醇沉淀的话等体积就可以了,用无水乙醇的话要用二倍体积去沉淀.
因为无论用哪种方法提取,沉淀DNA时总会加入高浓度的盐,加盐的目的是破坏能使蛋白质保持稳定的两个因素,使蛋白和DNA分离并沉淀下来.而此时盐的阳离子会与DNA结合形成DNA-阳离子盐溶于溶液中,再用无
果胶中含有醛基(—CHO),乙醇中含有羟基(—OH),醛基(—CHO)和羟基(—OH)发生反应形成一分子水和酯类化合物!学过点化学,只是个人认为是这样.
可以带滤纸放进去,没有危险,即使100度滤纸和乙醇也烧不起来.用乙醇洗过后,在漏斗里多抽一会,利用抽滤的风大致吹干,然后连滤纸抠出来,倒放在另一张大滤纸上,防止落灰,放进烘箱干燥.我也喜欢放在烘箱顶上
因为CaO和水反应生成Ca(OH)2这个反应并不完全,不像产生硫酸钡那样完全所以即使加入过量的CaO也不能保证水完全反应了因此不能用过滤法,要用蒸馏法
我们当时做实验的时候没有遇冷.不过遇冷后会降低DNA的溶解度更容易提取!
看你提取的DNA是不是沉淀可以看到了.如果可以看到很明显的一片就把它轻轻的弹起来,浸泡几分钟再离心,反复2-3次即可.如果你提取的沉淀颜色很深可以早70%的乙醇中浸泡过夜(4度),第二天再漂洗1-2次
这个是要看情况的.平常我们都用异丙醇沉淀,因为它沉淀效果比较好,但是异丙醇不容易除去,要用乙醇洗,乙醇就很容易除去啦
一般95%乙醇和无水乙醇都是可以用来沉淀DNA的,而75%乙醇一般是最后几步用来洗涤DNA的.
不溶的不是DNA,是蛋白没洗干净跑下电泳看看DNA条带就知道提出来没了
YouhavetothinkaboutthesolubilityofDNAinwaterandethanol.ThesurfaceofDNAishighlychargedandasaresultapo
1.DNA不溶于乙醇2.乙醇可以吸附水分子(极性相同),使得溶液中相对的水分子减少,增大了DNA在水中的相对浓度.3.附:乙醇沉淀DNA需要盐离子,用金属离子屏蔽DNA上磷酸的负电荷,降低DNA分子间
加完氯仿是用异丙醇析出RNA,我们是用75%的乙醇(用DEPC水来配)洗涤,乙醇是去各种离子的,无水乙醇不能去除离子,洗完之后一定要完全晾干,然后加入适量的DEPC水,在60度中水浴,直至溶解,如果部
氯化亚铜属于氯化物产品,用水会被水中的氧气氧化,会被溶解,所以要用无水乙醇,沸点78℃.用作溶剂、以及有机化学反应的乙氧基、乙酯化反应.挥发快.
异丙醇比较疏水,能很更好地沉淀核酸,用乙醇的目的是去盐,它比异丙醇更亲水,所以能去掉一些盐离子.有时还用70%的乙醇洗样品也是为了增加盐的溶解度.在沉淀核酸时可用乙醇与异丙醇,乙醇的极性要强于异丙醇,
白色沉淀应该是蛋白质.你确定是rna?向楼上说的,做个吸光光度值,确定一下吧.你是用什么抽提的,会不会用成了水饱和酚?那样有可能抽的是rna~
酚氯仿抽提DNA后,会使溶液分层,上层为水相,含有DNA;中间为蛋白(有时看不到);下层为有机相.原因是酚氯仿可以使蛋白质变性,从而从溶液中析出,但是蛋白密度会小于酚氯仿,所以离心后它分布在中间;而D