琼脂糖凝胶电泳中的marker
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/07 21:21:54
你给的信息的确很少了.楼上2位都分析的很好,不过,我补充说一下露姬雅关于质粒三条带的解释.现在对于3条带的解释是这样的:最前面跑最快的是超螺旋,质粒是超螺旋的,你电泳的时候最亮很正常;中间的是开环质粒
电泳出现拖尾现象,英文成为smear,就是弥散.其原因,主要从以下两个方面考虑:1、PCR产物自身原因:往往由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而
Shortprotocolsinmolecularbiology中推荐的溴化乙锭储存液浓度是0.5mg/ml,是1000X的,也就是说正常工作的时候工作浓度是这个的千分之一,凝胶中EB的浓度也是工作浓
不一定要取要取5µl,10µl,15µlDNA,你提取的应该是基因组DNA,主要看条带的位置判断你提取的DNA是否完整,从图上看出,与Marker比较,你提取的基因组DN
RNA跟DNA不一样,主要现象就是降解1.提取过程中RNA出现降解2.洗脱的时候洗掉了3.18S有部分降解4.弥散带说明降解严重,杂质过多5.28S部分降解RNA完美提出来的话应该是三条带:28,18
RNA分子有很多二级结构,需经变性剂处理,而DNA一般不需要变性处理RNA电泳的电泳槽及缓冲液均需要确保无RNAase,有RNAase抑制剂处理过;而DNA相应的则需要DNAase抑制剂处理所用的缓冲
首先,点样孔很亮,说明样品有蛋白污染,其次,条带出现笑脸,有拖尾,是电压过高所致,建议减小电压,一般用90V电压跑,您可以试一下,如果还是出现拖尾可以将电泳槽放在冰上跑.至于胶浓度,您可以搜索一下,根
根据你扩增的产物情况选择合适分辨率的凝胶浓度,比如:如果你的条带离引物二聚体很远,且比较单一,那可用1%~1.5%的胶即可,可稍微制厚一点,方便点样;如果你的条带只有一两百即离引物二聚体很紧或者非目标
几个月没问题电泳槽里就不行了,没几天水分会挥发的,而且使用次数多了缓冲能力也会下降,隔几天就换或者往里再添加点新鲜的吧
就是没有提出来,你可以用紫外风光光度计测一下你所提治理的260,看看有没有东西就知道了.
你的成相也太不清楚了,所以能发张清楚的图吗?还有你要分析什么啊?做的是什么?再问:就只有这两张图啊。至于做的就是“DNA琼脂糖电泳实验”啊,只是材料是自己提取的花菜的DNA和RNA。分析的话当然是推测
这是根据的DNA的浓度决定的,你的DNA的浓度大的话,你可以少上一点,DNA的浓度小的话,你可以多上一点,一般我们上3-5微升就可以,就能检测到了,你要是照胶需要图片的话,你可以先少上点,看看情况,再
点完样再加缓冲液,样品会被冲出来,另外不加缓冲液就拔梳子,孔道容易变形,不规则,
琼脂糖凝胶电泳marker是用来做参考的,类似于标尺的作用.marker会跑出很多条带,对应带的片段长度是一定的(不同的marker,不同,可以查询);通过找到与样品平齐的带,可以间接地判定样品的片段
发个照片看看.
1.trylowyouragaroseconcentration,say,to0.8%.2.heatyourPCRmixat60Cfor5minutesbeforeloadingit.3.whenyo
120V,越高跑的越快,但是跑出来的效果会差一些.我一般都是120V跑的,跑多久看你要分出来的带多大,条带之间大小差多少.再问:多少V/cm?再答:这个我一般没有注意。。。。。。再问:好吧,谢啦
如果是核酸marker比较简单吧,就是看marker条带的大小和你的目标条带的关系,尽量选择目标条带接近分子量的marker,或是在目标分子量附近条带较多的marker.另外就是,如果目标分子量很小,
换一个marker那么大浓度都跑不清楚那只能是marker自己有问题了
可能性太多了.1.你跑胶一般都要放MARKER或者叫DNALADDER吧,这个MARKER除外对DNA标记大小以外,还可以用来监控ELECTROPHORESIS的质量,如果MARKER显示而DNA没显