琼脂糖凝胶电泳中质粒DNA超螺旋.开环.直链跑胶快慢次序及原因
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/07/16 16:18:02
你给的信息的确很少了.楼上2位都分析的很好,不过,我补充说一下露姬雅关于质粒三条带的解释.现在对于3条带的解释是这样的:最前面跑最快的是超螺旋,质粒是超螺旋的,你电泳的时候最亮很正常;中间的是开环质粒
电泳出现拖尾现象,英文成为smear,就是弥散.其原因,主要从以下两个方面考虑:1、PCR产物自身原因:往往由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而
1、DNA的分子大小及构型不同构型DNA的移动速度次序为:供价闭环DNA(covalentlyclosedcircular,cccDNA)>直线DNA>开环的双链环状DNA.线状双链DNA分子在一定浓
用来鉴定DNA片段(单位是kDa)的大小的.maker是预制的含有标准片段长度DNA的混合物,在琼脂胶中不同的长度的片段跑的距离不同,通过比较用以初步确定样品中DNA片段的大小.如下图,最左边的是Ma
考虑以下因素:1.核酸染料是否足量2.琼脂糖凝胶以及电泳液是否为新制3.DNA的量是否足够查看原帖
RNA跟DNA不一样,主要现象就是降解1.提取过程中RNA出现降解2.洗脱的时候洗掉了3.18S有部分降解4.弥散带说明降解严重,杂质过多5.28S部分降解RNA完美提出来的话应该是三条带:28,18
RNA分子有很多二级结构,需经变性剂处理,而DNA一般不需要变性处理RNA电泳的电泳槽及缓冲液均需要确保无RNAase,有RNAase抑制剂处理过;而DNA相应的则需要DNAase抑制剂处理所用的缓冲
根据你扩增的产物情况选择合适分辨率的凝胶浓度,比如:如果你的条带离引物二聚体很远,且比较单一,那可用1%~1.5%的胶即可,可稍微制厚一点,方便点样;如果你的条带只有一两百即离引物二聚体很紧或者非目标
琼脂糖凝胶浓度与线性DNA分离范围参数:凝胶浓度(%)线性DNA长度(bp)0.51000~300000.7800~120001.0500~100001.2400~70001.5200~30002.0
你的成相也太不清楚了,所以能发张清楚的图吗?还有你要分析什么啊?做的是什么?再问:就只有这两张图啊。至于做的就是“DNA琼脂糖电泳实验”啊,只是材料是自己提取的花菜的DNA和RNA。分析的话当然是推测
这是根据的DNA的浓度决定的,你的DNA的浓度大的话,你可以少上一点,DNA的浓度小的话,你可以多上一点,一般我们上3-5微升就可以,就能检测到了,你要是照胶需要图片的话,你可以先少上点,看看情况,再
你这第一块是DNA第二块是质粒?怎么都有两条带?而且看你PCR结果基本没有扩出来啊,也不知道你要问什么问题.再问:第一个是质粒,第二个是DNA,pcr确实没扩出来,就分析一下这几个图结果的原因(跑胶的
点完样再加缓冲液,样品会被冲出来,另外不加缓冲液就拔梳子,孔道容易变形,不规则,
我硕士专业是分子生物学这方面的,我可以很负责地告诉你,质粒DNA分子具有三种构型:共价闭合环开DNA(cccDNA,SC构型)、开环DNA(OC构型)和线性分子(L构型).在细菌体内,质粒DNA是以负
目前为止,对身体低毒、稳定而灵敏度不输于EB的核酸染料只有sybrgreen,和gelred这两个的优点都是低毒性,而且稳定性很高,但是sybrgreen的灵敏度不如EB,且背景荧光很强,但普通的核酸
多大浓度的胶?加样孔在上面还是下面?marker多大,尤其最亮那条带是多少?另外,marker好像是在最右边啊.再问:0.8的胶。写错了,从左向右。marker最右边。加样孔在上面。只求能分析清楚每个
蛋白污染可以考虑用酚氯仿多抽提几次,记得吸上清的时候小心点,宁可浪费也别吸到界面.一般后续还需要用氯仿/异戊醇抽提来去除酚.这样基本蛋白污染就可以去干净.实在不行,抽提一次后,就用蛋白酶K消化30mi
1.trylowyouragaroseconcentration,say,to0.8%.2.heatyourPCRmixat60Cfor5minutesbeforeloadingit.3.whenyo
先回答楼下提取质粒时可能会残留乙醇.乙醇比缓冲液轻,如果样品有乙醇,你点样时乙醇就把样品带出来了.
Ethidiumbromideisanintercalatingagent,whenexposedtoultravioletlight,itwillfluorescewithanorangecolou