荧光定量PCR法用2-△△Ct
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/07/14 06:42:50
荧光定量PCR和实时荧光定量PCR是一样的啊
完全可以,PCR长度从50bp到数百都可以,不止局限于150-300个碱基对.楼上说的有道理,但是有一点要注意,最好计算一下扩增片段的Tm值,这样做溶解曲线的时候,光有一个峰还不够,而且得到的TM和你
RT可能含义:reversetranscribe是逆转录,那么相应pcr应该是由rna凡转录cdna过程realtime实时定量那么就是荧光定量pcr了
阈值和基线的设置肯定会影响Ct值,你可以采用每次反应完后软件自己选定的阈值.你也可以手动调整,但是如果你是相同的模板,做不同反应,那你必须使两次实验的阈值和基线调到相同.使用相同的标准品,才能减小不同
你好,这个要在开始的时候选择“相对定量”模式,软件才会给出扩增效率
这个很简单啊.你做了一次实验,得到的样本做了一次PCR,得到了一次的相对定量(设对照组为1).然后重新做实验,再做PCR,又得到一组,这样至少重复3次,就有3组相对定量了.计算标准差对照组的标准差:取
我们都自动假设这个两个前提的正确的了.只要你的引物特异性没太大问题这个可以从溶解度曲线上看出来没有杂峰什么的
根据你的问题简洁回答一下:第一.应该一起看.从你1.7乘以10的4次方copies/ml的数据可以证明你是乙肝小三阳患者.一般来说,小三阳的病人体内的病毒量较小,传染性也不强.乙肝大、小三阳只是乙肝病
博凌科为-为你如果lz确实已经确定该基因SNP位点以及突变型,你可以选择荧光定量PCR进行检测,检测方法是:1、探针设计在突变位置,有几个突变点设计几个(不同突变型需要不同的荧光标记:例如,野生型探针
一般参考标准是1.0E+03,也就是1000,你现在是已经是4.657E+07,也就是46570000了,很高了,请及时治疗吧.
仪器配套软件会直接给出来一个CT值,也可自己调节
最好还是在冰上做啦,一次两次没有问题,久了多了可能问题就出来了一般用的是灭菌的双蒸水保证引物的终浓度就可以.都是用水稀释的,没啥差别
请问你做RealTimePCR做几个循环的?40个吗?40个循环的话,CT值在30左右很正常的啊,CT值30的话大概是10000copies,说明模板含量低嘛,定量定量就是要CT值有大有小的才有比较嘛
1病毒检测结果说明乙肝病毒存在复制,但复制水平很低2两对半结果是小三阳(表面抗原,E抗体,核心抗体阳性),说明几点:A已经感染乙肝B病毒复制相对静止C传染性相对较小3两个检测结果是相符的4病情情况和肝
你一次实验做的数据,内参可以得到几个CT值,目的基因也会得到几个.这样的话,根据平均的CT值,就会得到一个倍数(相对量).实验肯定不会只做一次吧,至少重复3次以上.这样就会得到3个以上的倍数了.3个以
△△Ct=△Ct(试验样品)—△Ct(基准样品)△Ct(试验样品)=Ct(试验样品,目的基因)—Ct(试验样品,内参基因)△Ct(基准样品)=Ct(基准样品,目的基因)—Ct(基准样品,内参基因)2-
溶解曲线是在正常的PCR反应基础上加一个溶解曲线的反应条件,其中当温度由60℃升至95℃时,PCR仪每隔一定的温度检测一次信号.最后将收集的信号绘制出溶解曲线,然后将溶解曲线一次微分就会得到我们平时看
荧光定量PCR是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对产物进行分析,计算待测样品的初始模版.
△Ct(n)=Ct目的基因(n)-Ct内参基因(n);△△CT(n)=△Ct(n)-△Ct(1);然后算出2-△△CT;标准差我是同一处理做了3个平行算出来的.没法下标,用括号处理,