设计引物时一条在外显子另一条在内含子如何比对特异性
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/10/06 02:37:01
用PP5.0或oligo软件.网上有很多说明书的,操作十分简单再问:等于白说
这是基础知识问题,请抬头,看本页面的导航栏,找到专题,点击进去有个引物设计专题,把上面的资料都研究透彻了,如果还不会再问.同时你也可以去生物秀论坛pcr实验版块看看,相关文章很多.………………
构建载体需要酶切的,所以需要加接头的!
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1.用无限长无限长导线,你要知道用有限长导线在中学是没有公式的而且情况很复杂,不是你可以量他化计算的.2.dB=μIdlsina/4πr^2是毕奥萨伐尔定律,是由电流分布找指定点磁场的基本定律之一,这
ATCG.原理就是体外环境模仿人体内环境,完成人体内的DNA复制,大概就这样.
就问题本身而言,引物合成回来是固体粉末,你把它溶于水中,再做一步变性退火就行了(不过由于是hairpin,形成二聚体的可能性也很大,这个似乎不可避免).另外我不太明白为什么要用hairpin的引物?在
一条引物应该与A链一端的序列一致;令一条引物应该与B链在令一端的序列一致.走向应该都是从5’到3‘向基因内部走.
一条狗,一条蛇,另一条蛇,在做游戏.
一般要20个碱基的长度,一对,要防止形成发夹.
cDNA和mRNA的序列是互补的,如果用两个引物,最后的两条DNA序列分别对应于mRNA和cDNA中的一段.由于引物方向从5‘至3’,所以两个引物对应于mRNA和cDNA中相应序列即可.
是不是就是forward和reverse如果是双链DNA做模板的PCR的话就无所谓但是如果是RT-PCR,从RNA生成单链cDNA的话,你的forwardprimer必须跟原来的RNA的序列一个方向,
用primerpremie
首先查道你的基因序列(NCBI搜),第二查引物设计原则,第三下载个引物设计软件设计,简单好用的有primerpremier5.0,这些都能在网上搜到,软件用法也能搜到.
我也做得RT-PCR,是提取某物种中未测序的一段基因.是用近缘物种基因进行比对,得到保守序列设计引物,再提取总RNA,RT-PCR得到目的基因的片段再问:我需要检测的分子,在nucleotide里找不
一般对于已知序列的PCR当然不要从保守序列来设计引物,只要从开放可读框前后开始设计就行了.需要从保守序列设计引物的情况一般是两种,一是某个物种里面某个特定基因序列从未被分离过,但其进化关系相近的物种有
如果设计在内含子序列中,RT-PCR检测到的可能是未被剪切的preRNA或RNA中污染的核DNA,如果设计在外显子序列中,RT-PCR检测到的可能是成熟mRNA,未被剪切的preRNA或RNA中污染的
不用太纠结,有点儿具体也是可以的,一般都能P出来.再问:很多mRNA选择设计不同长度的引物,没有一对是无found显示的,真的很让人纠结;请问文献上的引物有的也是这样吗,不完美,但能扩出来,不会影响q
2758长的片段对引物没有啥特别的要求,25个bp以上的就行.关键是聚合酶的选择,要选保真性好的能过扩增长片段的酶.
1、画一条线段,以线段重合为边画一个矩形,移动到@50