质粒pet酶切步骤

没有,只有限制性核酸内切酶和DNA连接酶

n.宠物,受宠爱的人,不悦adj.宠爱的,亲昵的vt.宠爱vi.拥抱,爱抚,生气,发脾气

ThisaritclethroughthestepssuchasPCR,transformation,distillingplasmid,EcoRI,connectingmainlinks,purif

不管酶切还是PCR,都是间接的结果.要确定克隆的正确,一定要测序的啊.你测个序,问题就迎刃而解了.到底是什么问题也就清楚了.再问：我前些天去遇到一样的问题，酶切鉴定正确，但测序后什么也不是呢再答：所以

应该是可用不同限制酶露出相同黏性末端生物课本应该学了!有点时候刻意用两种限制性内切酶,得到不同粘性末端,更有利于载体的构建,因为基因有方向性

它们所切出的末端一样,这样根据碱基配对才能黏合,而他们中间的基因是不一样的,只是切口处相同.

因为是单酶切,所以可能有两种插入方向所以就是1+0.1=1.13+2.6=5.61+2.6=3.63+0.1=3.1这样子的其实一般来说只有一个方向的插入是正确的因此需要挑单克隆的菌株,然後用这种方式

我们是沉淀溶于TER（TE含RNaseA20μg/ml）,37℃水浴30min.

目的基因就是含有我要的那个DNA片段,当然还有其它无关片段,与质粒重组的后叫重组质粒.限制性内切酶不可能就刚好切出需要基因,少切了会破坏需要基因,多切了倒可以,只要有需要基因就能表达出相应产品.

第一个,你可以找一找你的师兄弟有没有,再找一找同学有没有?如果有的话就省了这笔钱.或者用你们手头现有的质粒去换.如果没有,可以找一些国内的公司去买,因为一些不好明说的原因,国内一些公司也有一些.这样会

看看lipo的说明书不就知道啦以6孔板的一个孔为例吧一管200ulOPTI+5ullipo静置5分钟另一管200ulOPTI+4mg质粒两管混匀静置20分钟后加到一个孔里4-6小时后换液再问：对于29

单酶切?双酶切?一个位点?两个位点?单酶切一个位点,完全一条带,不完全两条带,单酶切两个位点,完全,两条带,不完全,三条带,双酶切,完全两条带,不完全,三条带再问：若是单酶切两个位点，出现一条带是什么

问题描述不清.“同时做对照：质粒酶切回收的产物电转”?也就是说拿线性的质粒去电转做对照?如果是这样,你不如用感受态细胞直接做阴性对照,再用原质粒转化做阳性对照,这样更好分析结果.多克隆位点是很小一段,

要用同一种限制性内切酶对目的基因和质粒载体进行切割,再用DNA连接酶进行连接

用同种限制酶说明质粒里面也有和目的基因一样的基因''这样说是不正确的.限制酶识别的是碱基对序列的顺序而不是“基因种类”.用同样的限制酶处理目的基因和质粒是为了产生相同的粘性末端,以便可以将两者连接起来

你说的比较含糊,我猜你说的是质粒重组之前的准备,基因扩增或PCR过程会用到DNA聚合酶.质粒是基因载体,而基因的获得,现在一般多用到体外PCR扩增,扩增本质就是DNA合成,因此会用DNA合成酶.而具体

这样可以使切割后的目的基因与质粒连接上

1楼,你也太科普了吧.楼主,是这样的,这个题目的条件有点不全,但是我们可以得到这样的信息：把识别GGATCC的酶叫做E1,把识别GATC的酶叫E2,那么：1）E2也可以识别E1的酶切序列（都有GATC

做为具有使用性的载体,一般最少有2个以上不同的限制性酶切位点,这样能够保证需要插入片段的效率和插入的片段插入的方向性.如果只有一个酶切位点,那在做连接反应时候载体自连现象会非常严重,同时插入片段有可能

电泳结果只能看出序列碱基数的大概,你要分析哪方面的啊再问：这是我们大三的分子实验，结果分析那里我卡住了我也不知道能从哪些方面分析？再答：电泳的目的就是看PCR产物以及其他一些试验品的碱基数，通过和ma