Pcr中为什么用双蒸水

其实虽然tap酶的最适温度在75度,但处于这个温度下酶失活的速度也较72度要快,而72度时,酶的活力与75度相比虽有下降,但对最终结果影响不大而且温度高,不利于引物和模板的结合,也不利于合成出的dna

因为DNA聚合时需要3‘OH,这个只能由引物提供（没原因,就因为是那样）.这个引物是一小段RNA,引物绝对是RNA,而不是DNA.看看DNA复制需要什么酶就知道了,需要依赖DNA的RNA聚合酶（DDR

很简单,防止外源基因混入造成复制的DNA不纯.

一般PCR使用两条引物,前后各一条,与模版DNA结合上后,前后的引物形成复制起始位点,共同向中间扩增,直到连上,一次扩增完成.

你理解的没错.上下游引物同时用才能特异性扩增中间的那部分片段.

看家基因的意思是稳定表达的一种基因所以他的作用就是用来做内参比如在做PCR的时候,初始的模板量的不同直接导致扩增后的量的差别,那么看家基因的作用就出现了,要在看家基因的表达水平相同的情况下,比较其他基

构建载体需要酶切的,所以需要加接头的!

体内DNA复制也是有引物的,你好好再看看课本吧.引物在PCR以及DNA复制中的作用就是起到引导DNA聚合酶结合和开始聚合反应的过程.

解题思路：在PCR技术中双链DNA分子中每条链都要和引物结合，进行复制。解题过程：解析：引物在PCR以及DNA复制中的作用就是起到引导DNA聚合酶结合和开始聚合反应的过程。因为PCR中，DNA聚合酶不

因为理论上即使只有一个拷贝的目的基因也能通过多次的循环而被指数次地扩增,而被检测到.而特异的引物能扩增得特异的序列所以PCR具有高度灵敏性和特异性

DNA的复制需要RNA引物,这是由DNA聚合酶和RNA聚合酶的特性决定的.DNA聚合酶不能从头合成DNA（需要引物DNAorRNA）,因为DNA聚合酶具有高保真系统,这个系统要求,在新链的延伸过程中,

第一个一般在94－95度左右,叫做变性,就是通过加热打开双链.第二个温度点叫做退火,根据引物的TM算出,一般比TM低5度,有利于引物的结合.第三个温度叫做延伸,一般采用72度.是引物结合后DNA聚合酶

因为内参和目标基因的扩增效率有可能不一样,所以CT值不能直接相减.只能是内参间先算出相对量,目的基因也算出相对量（倍数）,然后在用目的基因的倍数除以内参的倍数.再问：一共有三个内参基因，他们的几何平均

RNA在外界容易降解,所以在体外用DNA.这样比较容易操作.

pcr仪控温模块多为铝制模块,长期和空气中水蒸气接触,加上pcr反应本身需要长期升降温反应很容易在铝块表面生成锈斑,而孔内生成的锈斑又很难清理,这样会导致控温精确性出现偏差,影响实验效果.镀金就是为了

一、可以使用oligo6或者primer5等软件设计.用这些软件选择引物,主要就是看引物的稳定性,形成二聚体的可能性,退火温度等等参数.二、如果你的序列同源性不高,GC含量也还可以的话,可以使用一些经

taq聚合酶并不是说温度很高就不失活,而是能够在高温下维持一段时间活性.常规的taq聚合酶在PCR反应中大概能够维持2～3小时活性,实际上在2小时以后酶的活性就会显著降低了.为什么要将酶保存在低温呢,

若是普通PCR,做完以后要通过电泳鉴定目的片段的大小是否为想要的,条带的亮度可以反映模板的两是否足够,也可以看是否存在引物二聚体,借此优化PCR条件和体系若是RealTimePCR,尽管可以直接看显示

使用随机引物,可以检测.即RAPD（随机扩怎多态性）RAPD是建立在PCR(PolymeraseChainReaction)基础之上的一种可对整个未知序列的基因组进行多态性分析的分子技术.其以基因组D

说明没扩出来呗建议1.增加actin等参照管做对照.actin表达比较保守且表达量高,均可以扩出来.如果扩不出来说明你RNA有问题,重新抽提2.如果参照没问题,和你的引物分别一起扩,配一样的体系,如果