PCR凝胶电泳负极什么颜色
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/10/06 17:31:27
检验一下产生的扩增后的片段的长度和浓度~要是片段长度为目的片段长度或者相差不多的话,就说明扩增成功了~有的时候扩增完电泳会发现片段长度与目的基因的差了好多,那就是有问题啦~而且有的时候还会出现多条带等
两者原因,可能是PCR体系没设计好,或者是胶没制好,跑电泳时注意保持电流恒定再问:多谢指教!跑电泳时我用的是恒功率,这个影响会很大吗?最近在做SSR标记有点迷茫!
非变性凝胶里面没加变性剂,一般是SDS.非变性胶跑出来的蛋白能保持其活性一般用做功能试验,如EMSA.由于没有变性剂的原因非变性胶电泳时除了与蛋白分子量有关也会受都电荷的影响,因此对蛋白等电点的确定和
RNA分子有很多二级结构,需经变性剂处理,而DNA一般不需要变性处理RNA电泳的电泳槽及缓冲液均需要确保无RNAase,有RNAase抑制剂处理过;而DNA相应的则需要DNAase抑制剂处理所用的缓冲
实验有没有跑标准分子量DNAMarker?如果Marker电泳后条带正常,那么就是PCR无扩增条带;如果Marker也看不见,那就是配胶有问题,或者配胶用的试剂(比如染料)有问题
凝胶电泳或称胶体电泳是一大类技术,被科学工作者用于分离不同物理性质(如大小、形状、等电点等)的分子.凝胶电泳通常用于分析用途,但也可以作为制备技术,在采用某些方法(如质谱(MS)、聚合酶链式反应(PC
恩,原始的方法是PCR产物与变性缓冲液混合,95或98度变性5到10分钟.变性缓冲液中含有甲酰胺,是一种变性剂.后来出现了核酸外切酶,PCR产物酶切成单链再跑,变性不变性效果可能一样的,不过酶有点贵.
因为染色的时候没有将胶体在银染液中铺开,重叠的地方就会出现银染不均匀的现象.摇床如果摇摆的幅度不大,则要自行震荡铺开.多块胶体注意尽量不要重叠在一起,也会出现胶体出现花纹的现象.
就是觉得用已经反应完的pcr产物,用相同的引物重新进行扩增,得到跟多的产物.但是扩增时应注意体系,不然扩增产物的电泳图会出现严重的拖尾现象.
你这第一块是DNA第二块是质粒?怎么都有两条带?而且看你PCR结果基本没有扩出来啊,也不知道你要问什么问题.再问:第一个是质粒,第二个是DNA,pcr确实没扩出来,就分析一下这几个图结果的原因(跑胶的
对PCR产物进行变性时加的染液应该就是变性缓冲液吧,应该买试剂盒里面会有.在94度上放置5分钟后迅速放在冰上防止DNA复性就是了.再问:你好,还在吗,在94度进行变性5min,这个过程和PCR循环是没
不一定要倒置.要先预测你的目标蛋白是酸性的还是碱性的,分离碱性蛋白时候,要利用低pH凝胶系统,分离酸性蛋白时候,要利用高pH凝胶系统.酸性蛋白通常在非变性凝胶电泳中采用的pH是8.8的缓冲系统,蛋白会
分离不同荷电量、不同分子量的物质,而使其固定在凝胶中而不是丢失在溶液中.可以调节凝胶浓度而调节网孔大小,以适应你的目标物质的分子量.一般可用于蛋白核酸等两性大分子物质分离分析.
巢式PCR是一种变异的聚合酶链反应(PCR),使用两对(而非一对)PCR引物扩增完整的片段.第一对PCR引物扩增片段和普通PCR相似.第二对引物称为巢式引物(因为他们在第一次PCR扩增片段的内部)结合
应该模板量太大了,可以稀释一下模板;也可调整一下PCR体系,凭经验,如果模板纯度很高,取0.1微就足够了
通过凝胶成像系统拍摄图片,注意调整对比度.如果是写报告的话,可以标记出Marker各条带的分子量以及亮度,详见说明书;然后说明扩增片段与目的片段大小相同,均为XX;如果图像上有杂带可以分析一下,比如可
这个看上去像是你在做梯度PCR,所以有很多条带是弥散状的,你可以把比较清晰的条带回收回来,作为模板,利用你之前做梯度得到的优化后的PCR条件再进行一次PCR,看效果如何.补充:这样的话,可能是你不同样
1%的就可以,marker要有小的否则容易跑出胶
共显性:说白了就是可以分辨出纯合的跟杂合的这个有图示比较好理解.http://hi.baidu.com/%B6%E01%C9%E3%CA%CF%B6%C8%C8%C8%B0%AE/album/item
不是啊,PCR扩增后再用琼脂糖凝胶电泳检测.