PCR扩增出来的DAN片段电泳时,原来的DAN双链怎么出现

这样就P不出来的啊要换模板的必须要比目的基因要长再问：谢谢。只能重新设计了。

第二次比如目的基因是300bps,母链DNA2000bpsforwardprimer从母链第25碱基开始由5'-3'开始复制,backwardprimer从第325由3'-5'开始反向复制.第一次复制

pcr扩增出来就是目的基因.假设这是一段基因（两条链一个道理我就只表示一条了）--------------+————————=-------------------中间是目的基因,=和+表示它的两端,

这是由你设计的引物决定,一般控制在200bp以下为佳.包括你要检测的目的基因,设计的片段长度也控制在200bp以内.保证扩增效率较为一致.

为了形象,不写ATCG,换个比较容易看懂的形式模板是：abcd123.456efgh上游引物是：987ABCD123下游引物是：456EFGH789（这里为了方便观察下游印务给出了3’-5‘形式,通常

中间有一段未知没有关系啊,从两头已知的里面设计引物,然后进行PCR,克隆到载体上,或者PCR产物直接送去测序,测序结果blast即可

actin如果都扩不出来那不是反转有问题就是RNA已经降解了.建议检查这两步的样品.建议检查程序,重新反转,如果还是扩不出来的话,重新抽RNA,再不行,回家过年吧.

能说下原题么、

貌似没听说过,你的酶和dNTP买回来之后说明书上会给出你合适的体系,那个dNTP绝对都是足量的.

应该没有问题确认一下你的GCbuffer里边的试剂的背景会不会对你的PCR产物有干扰有问题的话只能努力洗洗柱子.

带电颗粒在电场作用下,向着与其电性相反的电极移动,称为电泳(electrophoresis,EP).利用带电粒子在电场中移动速度不同而达到分离的技术称为电泳技术.1937年瑞典学者A.W.K.蒂塞利乌

1.有没有你的程序尤其是温度.2.引物没问题?3.样品DNA没问题?4.染色没问题?（最好是电用完以后染色比较安全,15-20min最佳）

在电泳的时候加上DNA的分子量marker,一般16S的大小都是1.5kb吧（很久不做了,记不太清楚）.如果有明显的目的条带而且大小也合适的话那就一般不会错,如果想要确定,可以将条带从胶中切下来,回收

非特异性条带的出现,其原因：一是引物与靶序列不完全互补、或引物聚合形成二聚体.二是Mg2+离子浓度过高、退火温度过低,及PCR循环次数过多有关.其次是酶的质和量,往往一些来源的酶易出现非特异条带而另一

.PCR每分钟能扩增多长的片段和PCR仪没有关系,只和你PCR体系中的酶和buffer有关.再问：那到底每分钟能够扩增多少bp的片段啊再答：你看看你用的是什么酶，找找那酶的说明书，上面肯定写了再问：酶

PCR的反应在进行时,的确会产生不需要的片段.实际应用的时候,我们都会在需要的基因片段上染色或者标记萤光.由于价格上的原因,目前国外的实验室都采用染色的方法.而且随着反应的进行,由于大量引物的存在,需

1.首先需要的是marker,即有既定片段长度的DNA片段.2.看胶,里点样孔越近的DNA片段长度越大,离点样孔远的DNA片段长度小.以你的图片看,5.6两个孔的片段比前边4个孔的片段短,如果你知道前

pfudnapolymerase是目前已知dna合成准确性最高的酶.在正常的pcr扩增程序下,其扩增产物的错误率为4000bp中发生一个.错误率仅为taqdnapolymerase的1∕7--1∕10

可分为长产物片段和短产物片段两部分.短产物片段的长度严格地限定在两个引物链5'端之间,是需要扩增的特定片段.短产物片段和长产物片段是由于引物所结合的模板不一样而形成的,以一个原始模板为例,在第一个反应

1退火温度不合适2引物不合适3模板有问题4酶由问题