跪求 土壤微生物的测定:涂布平板法 测定细菌.真菌和放线菌的实验步骤(详细)

将土壤溶于无菌水用磷钼蓝染色法测液体中的磷具体步骤网上有很多资料

两种不同的方法目的不一样.稀释涂布法：优点：可以计数,可以观察菌落特征.缺点：吸收量较少,较麻烦,平板不干燥效果不好,容易蔓延.一般用于平板培养基的回收率计数!平板划线法：优点：可以观察菌落特征,对混

1.用铝盒盛土壤样品.2.称重记为w3.烘干.温度在102~105度间.4.称重记为M5.将土倒去,称重记为b6.计算土壤含水率=(m-b/)w*100%注意:需要三次重复.

将土壤制成悬浊液,稀释为1/10、1/100、1/1000,分别涂布平板,培养后数菌落数,用cfu做单位,可代表活菌数,由此可计数原土壤中的微生物含量.具体方法请查一下平板活菌计数之类的实验设计.至于

红细胞计数法是用显微计数板来在显微镜下计算红细胞的密度.平板划线法是分离微生物的方法,并不是计数方法.稀释涂布法是用来计数的.再问：那什么时候用红细胞计数法什么时候用稀释涂布呢

土壤菌一般用土壤浸出液来培养,菌体浓度低,所以一般在接种时采用涂布法.

《土壤微生物研究原理与方法》主编林先贵高等教育出版社2010这本书应该是最新的了,我做实验用的就是这本

土壤中绝大多数微生物是不可培养的微生物,无法在人工平板上生长；所以有了宏基因组学

详细的自己去查书,我说大概1.土样按一定量拿来后融于水中.2.稀释多少倍自己定,（因为这需要做预实验,估计范围）3.做平板培养基.4.将稀释后的溶液涂平板.涂的方式有很多,自己定,划线也行5.等个12

最好的办法是新鲜的土壤来测定,4度保鲜可以,但是时间不能太久,最长一周左右,太久容易发霉.实在没办法只有-20度,土壤取出来之后醒上一段时间再测定.总之土壤取出来之后环境条件就会变化,就会影响到微生物

一般情况下土壤微生物测定用干土是可以的,但是会影响检测结果,有些微生物的检测要求也不一样,所以,要具体情况具体分析,具体对待.再问：那把鲜土保存到负80度冰箱后，冷冻后再测土壤中可培养微生物，可以吗？

有特定的土壤电导率仪,不太贵.网上有卖的!

培养基都是标准的不防试试放线酮,剂量不好说你要计数的话也可以用稀释的方法降低菌体浓度.

1.营养琼脂培养基的配置,按照药瓶上的说明书就行.倒平板2.才取3土样,地表3CM下湿润土壤3.无菌水溶解,震荡充分,可放点玻璃珠4.作5到6个梯度的稀释5.取几个稀释度的土壤液涂板,每个板加100U

由于土壤中细菌种类繁多,它们对营养和其他生长条件的要求差别很大,不可能找到一种培养基在一种条件下,使土壤中所有的细菌均能生长繁殖.例如土壤中的高度厌氧菌就不能用普通的平板法分离

最准确的测定方法是用Real-timeqPCR.提取土壤中微生物的总DNA,然后以16SrRNA作为目标序列,设计引物进行绝对定量.目的片段一般在200-300bp比较合适,所以引物可以采用V3或其它

酸性土壤使用“NYT1121.7-2006酸性土壤有效磷的测定”的方法,盐酸-氟化铵法,石灰性土壤（或中性、碱性）多采用“NYT12297-1990石灰性土壤有效磷测定方法”的方法,即碳酸氢钠法,标准

划线平板接种法：为最常用的分离培养细菌的方法,通过平板划线后,可使细菌分散生长,形成单个菌落,有利于从含有多种细菌的标本中分离出目的菌.其目的都要使细菌呈现单个菌落生长,便于同杂菌菌落鉴别.涂布平板法

其目的是一样的：1、防止杂菌掉落（最关键）2、水气是往上蒸发的,可以减慢其干燥速度.

测定微生物生长是根据在不更换培养基的条件下,在不同的时期测定或的微生物细胞含量变化.其意义主要是用于进一步研究微生物发酵.如扩大培养时的菌种接种时间,接种量,如何提高发酵产量等.微生物生长测定方法有很