钙离子的作用目的基因导入微生物细胞
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/10/02 19:08:02
原核细胞,一般应用得最广泛的是大肠杆菌细胞
农杆菌转化法起初只能用于双子叶植物.后来可以应用到一些单子叶植物.基因枪法单双子叶植物都可以使用.花粉管通道法理论上可以用于所有的开花植物.
可能基因片段在扩增过程中出现突变可能启动子不够强可能受体细胞缺少表达该基因所需的原件
微生物转化中采用氯化钙来改变其通透性是为了制感受态细胞,原理是,用低渗CaCl2溶液在低温(0℃)时处理快速生长的细菌,此时细菌膨胀成球形,外源DNA分子在此条件下易形成抗DNA酶的羟基-钙磷酸复合物
不导入,其实目前人们也做不到,不过有一种基因治疗方法方法:用改造的腺病毒感染人体,病毒会将目的基因整合进细胞核DNA(不知道这算不算你说的基因治疗中目的基因导入细胞核,人们在基因治疗上刚刚起步,有太多
转基因一般用质粒为载体质粒导入酵母菌后在细胞质中酵母基因在细胞核中不会相互干扰
钙离子转化法啊.选修三的内容
筛选用的.因为基因重组到质粒后需要导入受体细胞进行表达.质粒中有一些是重组的有一些是没有切开或者重组不成功的重新变回原来的质粒.那么筛选的时候如果细菌长出来其中一个抗性另一个不抗性那么可以说明中间被插
当然可行,但无实际意义.再问:我是外行,请问这样和导入大肠杆菌或者酵母中有什么差别吗?我是想该菌自身就能够产该酶,如果再导入可否提高产量?谢谢再答:理论上可以增加产量,但实际上基因的表达要受调控基因的
导入时一回事,表达是另一回事你导入了不一定会表达,导入的目的是使目的基因在受体内表达出来.你必需构建好了载体(终止子,开始子,标记基因.等等),再植入到受体细胞中,从而表达出目的基因所控制的形状.
植物常用的是:农杆菌转化法,基因枪法和花粉管通道法动物就是利用显微注射,或者灭活的病毒转导.细菌可以转化、转导.转化是利用细菌的某些特别菌株;转导是利用噬菌体.
细菌是具有细胞膜的,植物细胞膜由纤维素果胶组成,细菌是有肽聚糖组成,但是钙离子似乎改变的是细胞膜的通透性哦,变成感受态细胞再问:书上写细胞壁。老师也强调是细胞壁。。。再答:可能是直接把那个当成细胞壁看
你说的一点都没错.所以标记基因作用的另外一个说法更准确:“筛选含有目的基因的细胞”,当然这个筛选也只是初步筛选,要想确认是否含有目的基因,要用“DNA分子杂交技术”.
标记基因即根据抗性相关表型判断
分子克隆的过程中,TRANSFORMATION实验中成功摄入并且表达靶向质粒的细菌,由于靶向质粒中抗生素基因的存在,因此可以在添加有抗生素的培养基中存活.而未曾摄入表达靶向质粒的细菌本身缺乏抗生素基因
质粒是细菌细胞内一种自我复制的环状双链DNA分子,能稳定地独立存在于染色体外,并传递到子代,一般不整合到宿主染色体上.现在常用的质粒大多数是经过改造或人工构建的,常含抗生素抗性基因,是重组DNA技术中
由于元和生物具有一些其他生物没有的特点,繁殖快,多为单细胞,遗传物质相对较少等,因此,早期的基因工程操作都用远隔生物作为感受细胞,其中以大肠杆菌应用最为广泛.大肠杆菌细胞最长用的转化方法是.首先用Ca
大肠杆菌细胞最常用的转化方法是:首先用钙离子处理细胞,使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态(本质上是使细胞壁的通透性增加),这种细胞成为感受态细胞.第二步是将重组表达载体DNA分子溶于缓
我们课件写的是Ca2+处理法用钙离子处理细胞,钙离子处理过的细胞称为感受态细胞.
钙离子处理过的细胞称为感受态细胞.所谓感受态就是能够比较容易吸收物质即通透性变大不管是原核还是真核的都可以.用氯化钙处理细菌后,实质是增加了细胞膜的通透性,不是细胞壁.细胞壁本来就是全透性的.