RNA反转时用oligoDt和随机引物有啥区别
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/07/17 17:28:27
如果化学试剂商店没有吡罗红甲基绿混装粉,可以分别购买甲基绿和吡罗红G(注意:用于核酸染色的是吡罗红G,请不要错买吡罗红B),然后按以下方法配制.①染色剂A液的配制方法取甲基绿2g溶于98mL蒸馏水中,
理论应该用CDNA进行因为设计,但要保证你提取的mRNA的质量,尽量减少降解.可以在原序列基础上先写出互补序列再进行引物设计.
就以慢病毒为例.包装好的病毒只含有结构质粒5'LTR和3'LTR之间的RNA序列.多质粒系统指的是慢病毒的包装系统,就三质粒(包装质粒、包膜蛋白质粒、转移质粒)包装系统来说,病毒包装必需的3个蛋白Ga
影响不大,不用考虑.TRIZOL等常用方法提出来的总RNA都有一些蛋白质污染.
miRNA是小RNA啊.总RNA反转包括了所有mRNA以及一部分rRNA.前者是做RNA干扰研究的,后者是常规实验了.再问:miRNA反转会得到怎样的DNA呢?
反转录病毒能通过反转录酶的作用下,以病毒RNA为模板,合成互补的DNA后,进而在DNA聚合酶的作用下,由DNA复制成双链DNA.再问:-+RNA不是也可以么?再答:那你为什么不选b,那不是更正确,只有
DNA复制是以自身的两条链为模板,利用酶,游离的脱氧核苷酸,线粒体提供的能量,以碱基互补配对为原则,即G-C,A-T,进行半保留复制,复制出DNA.RNA制是以自身的一条链为模板,利用酶,游离的核糖核
最好是做标准曲线,要看看扩增效率的.调CDNA就还了~再问:调CDNA和总RNA是一样的吧?反转录不是将总RNA都反转录成CDNA吗?再答:不一样的,不能保证每管的反转录效果一致再问:哦,直接测定cD
有些RNA病毒不反转录有些ssRNA病毒,一旦病毒颗粒中的RNA进入寄主细胞,就直接作为mRNA,翻译出所编码的蛋白质,其中包括衣壳蛋白和病毒的RNA聚合酶.然后在病毒RNA聚合酶的作用下复制病毒RN
理论上来讲如果可以实现反转译的话,各种组成蛋白质的氨基酸都应该可以找出起对应的密码子,进而可以推断出其对应的DNA或RNA序列,这样的话就可以先合成出需要的基因,进而用生物方法使其转录翻译,由此就可以
是的.总RNA应该包括mRNA,mRNA前体,核RNA和核糖体RNA.或者换个说法就是编码RNA和非编码RNA.你说的基本正确,但tRNA通常不包括在内.cDNA文库是通过细胞中的RNA反转录得到DN
小麦总RNA的提取实验目的从黄化小麦苗中提取总RNA,可以为cDNA文库的构建做好准备.我们重点是要保证RNA的完整性、产率、防止修饰和纯度,尤其是完整性、防止修饰和纯度.RNA是单链,2’OH是它的
操作步骤是先加RNA、OligodT、随即引物、水65C反应10min,冰上放置5min后:这一步是让RNA变性,把RNA的二级结构打开;再加dNTP,RNaseA,BUFFER,MTV逆转录酶,反应
作用两个:一改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞二使染色质中的蛋白质与DNA分离,使染色剂与DNA结合
DNA片段是插不到RNA去的.但是我们可以将目的基因的转录出mRNA插到反转录病毒的RNA里.让它们一起反转录生成含有目的基因的DNA.
博凌科为-为你如果是使用试剂盒的话就可以按照实际和的步骤操作,一般的步骤是取材(液氮保存)-提取RNA-使用反转录引物(带有PolyA)合成第一链CDNA-去除RNA-合成第二链cDNA-在第二链cD
我不了解你的实际情况,我给你几条建议:1.可能是内参引物有问题2.你扩增内参基因的PCR条件设计可能有问题,如Tm3.你用的是一块胶吗?加核酸染料了吗?
DTT上的巯基可以保护逆转录所用酶的二硫键,增加蛋白稳定性.还是加吧~