RNA提取为什么要加液氮研磨
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/10/04 15:17:13
多放一点液氮,磨得时间适当长一些.如果你的样品比较多,在液氮还没有蒸发前迅速把粉末转移到EP官管中,然后把它暂时放到-20的冰箱中,等所有的样品全部磨好后统一加CTAB.你做实验的时候材料最好尽量新鲜
可不可以把真菌先弄到培养基培养下?真菌有筛选培养基吗?(没做过真菌,纯讨论学习)感觉提之前要分开.用提核酸的方法,你用不用液氮,都是一起提出来.因为核心原理就是一样的:蛋白变性,有机试剂萃取,沉淀.而
碳酸钙是为了防止研磨中色素被破坏棉塞是为了防止乙醇挥发
液氮的温度可以达到零下190多度,研磨时在液氮下操作主要是由于:(1)植物细胞在极低温度时细胞壁会变得很脆,有利于细胞更好的破碎,释放RNA.(2)RNA容易降解,低温可以防止由于研磨产生的热降解RN
估计还是速度不够快~之前做实验也是,一直没达到那样的效果,液氮的温度太低,即是在室温冰块上操作很容易使研钵吸附水蒸汽液化吧~!可以试试在极低温度且有干燥器的环境~!而且研磨并不能很容易的研磨为粉状,多
不与人体直接接触,是没有任何影响的!再问:就怕挥发的气溶性病灶DNA,心理压力大再答:操作之前做好准备就好了,问题不大的。再问:怎么准备?关键不是我操作,别人直接研磨处理,没有预防措施。再答:额。其实
第一;防止丙酮挥发;第二;防止氧化
加入少许碳酸钙的目的是为了防止在研磨过程中,叶绿素受到破坏.具体的情况是这样的:叶绿体中的色素所处的环境具微碱性,实验中,由于研磨会使细胞结构遭到破坏,细胞液(具微酸性)流出,酸性的细胞液就会直接接触
充分是为了研碎细胞保证色素溶出,迅速是为了减少溶剂蒸发,丙酮挥发性较强,塞紧试管口也是因为挥发性,丙酮有一定毒性,对中学生来说少接触为好,但是在一般的化学实验室丙酮是大量使用的普通溶剂
液氮主要是破坏细胞壁的.如果你用了细胞壁破碎的酶类可以不用液氮.否则一定要用液氮.细胞壁不破坏DNA释放不出来的.(CTAB只跟细胞膜发生作用)再问:CTAB法提取真菌DNA,加氯仿异戊醇后,要在振荡
由于液氮温度很低,用液氮来冷冻组织可以快速地达到低温,防止组织被破坏.
液氮研磨,一个原因是为了停止细胞内外一切生物反应,比如提取RNA,防止RNA酶的降解反应等;还有一个原因,就是在液氮中的细胞完全冻硬了,研磨可以达到很好的破胞效果,将细胞磨成粉,里边的物质释放出来.你
种子类较难研磨,一般加液氮3次连续研磨,要保持样品冻结状态不能化冻,以免降解.研磨粗细程度一般应跟粗面粉差不多,无明显颗粒感即可,冻结状态研磨不会导致DNA降解.
一般在solutionI里加入RNase的.已经提取出来的质粒有RNA污染,如果直接加RNase消化RNA,则在消化后应该使用氯仿抽提去除RNase.然后再使用醋酸钠/异丙醇沉淀回收质粒.其实现在质粒
1:低温导致植物组织冻裂,方便研磨使细胞破碎,使DNA释放完全2:低温情况下各酶处于低活性状态,有利于抑制DNAase的作用,保护DNA
可能是叶片中的多糖捣乱.对提取结果不会有太大影响,只要你加入氯仿离心后能分开水相和有机相就行.宁可损失点,别把界面的沉淀物吸出来
RNA自然分解也许受酸碱性影响,用的什么组织?
因为是用单层尼龙布来过滤研磨液的.用滤纸会把色素吸收掉.
不加液氮也可以,前题是可以把材料研磨碎.我以前提DNA加液氮是要提二三十管时用的,液氮可以快速研磨材料.
把样品放入研钵中,倒入少量液氮,液氮就会像沸腾了一样,这时候迅速研磨.动作一定不要太大,最好是用手心的力量往下旋转着碾碎,动作太大会把样品溅飞,如果样品量很少直接就可能磨没了.大约几秒沸腾就结束,再磨