sds中分离胶和浓缩胶的ph为什么不同

这个步骤称为水封目的是隔绝空气使催化反应快速进行,进而形成凝胶,还可使分离胶上沿平直.并且加水后,保持分离胶表面的平整性,使浓缩胶和分离胶都处于同一水平面上.

可以用电泳,将未处理蛋白质a纯品和处理过的a在相同条件下电泳,观察电泳图,如果电泳条带不一样,并且这些不一样的条带都迁移得比较远,说明分解了.再问：可是蛋白质a的分子量是未知的，我跑了一次，什么都看不

SDS可以中和蛋白质表面电荷,并破坏蛋白质构象,使其成为线性.这样分离时只和蛋白质的分子量有关,而与构象等无关.

为什么又问一遍呢?是（聚）丙烯酰胺浓度啊,当然其他物质比例也要作相应的调整,聚丙烯酰胺胶本身的分离能力是由聚丙烯酰胺提供的,正如琼脂糖凝胶的分离能力是由琼脂糖提供的一样.

你是要做活性胶吧.这种胶又叫naturalgel.顾名思义就是蛋白质在其中电泳的时候是保持不变性的.所以不能有SDS.下面是一篇参考文献,如何做SOD活性胶：

6%12%,10%

可以考虑如下几个因素1.玻璃是不是洗干净且烘干了2.倒胶时胶是否刚配好混匀,没有凝固3.槽底和四周是否密合,没有漏胶4.水或有机溶液封胶面时,是否沿一侧轻轻加入小心放平5.其它原因,未凝固时剧烈摇动?

一、可能是玻璃板没有加紧二、浓缩胶没有凝固好,灌胶的问题三、电压是否大了?我们常用浓缩胶80v,30min.灌胶的问题可能性比较大,祝实验顺利

电泳缓冲液是Tris-甘氨酸电泳缓冲液.上样缓冲液是SDS缓冲液,需要加入Tris-Hcl,DTT,SDS,溴酚蓝和甘油.分离胶配制过程中的缓冲液是PH8.8的Tris-Hcl浓缩胶配制过程中的缓冲液

SDS是一种阴离子去垢剂,它和蛋白上的氨基酸残基1：1结合使蛋白带负电,这样就使得蛋白的二级结构完全打开并且都会带上负电.SDS－PAGE中,这样带负电的蛋白在电泳过程中只会根据其分子量来分离,而不会

检查一下AP和TEMED1.AP有可能是吸水结块了或者是被氧化了配的时候尽量去中间的部分可以试试加大AP的量2.TEMED吸水或氧化了看看颜色是否已经很黄了如果是就要换新的3.可以试试将胶放入烘箱30

你可以用12%的胶浓度,如果marker是fermentas家的SDS非预染marker（批号SM0431）的话,可以看到116kd66.2kd45kd35kd25kd18.4kd14.4kd,这样你

我想楼主是不是想问浓缩胶的浓缩原理?不连续系统的凝胶包括浓缩胶和分离胶.浓缩胶的孔径大,分离胶的孔径小.在电场的作用下,蛋白质颗粒在大孔胶中泳动时遇到的阻力小,移动快.而在小孔胶中泳动时遇到的阻力大,

浓缩胶凝的快没有太大影响,一般三四十分钟就可以.如果怀疑效果,可以检查一下单体是否发生变化,单体要低温避光保存.

您要这道其中的原理就理解了.凝胶过滤时小分子进入凝胶的孔隙,大分子则直接洗脱,所以大分子先出来.电泳是利用蛋白质带电荷受到电场力和凝胶阻滞的作用,大分子当然跑得慢了.这两种胶是完全不同的,虽然中文翻译

两种方法原理不同,有差异是正常的.如果差距较大,要仔细分析.一般凝胶层析是非变性的,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳是变性的,二硫键也被还原,所以是亚基（肽链）分子量.凝胶层析与分子形状有关,一般marke

1,看目的蛋白的大小一般actin以下的可以跑12胶红线左右可以用12或10跑几百的很大的用6的胶小蛋白12的10的一般都能跑如果不考虑效率的话...能跑多慢跑多慢,越慢跑的越好看2,看样品浓度多少,

在SDS－PAGE不连续电泳中,制胶缓冲液使用的是Tris－HCL缓冲系统,浓缩胶是pH6.7,分离胶pH8.9；而电泳缓冲液使用的Tris－甘氨酸缓冲系统.在浓缩胶中,其pH环境呈弱酸性,因此甘氨酸

蛋白质等电点

增大溶液密度,使加样时样品溶液可以沉入样品凹槽底部