SDS凝胶电泳条带不能完全跑开
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/10/07 00:07:09
分子量小的,跑的快.————————————————————————————————————————————————————————SDS是阴离子去污剂,作为变性剂和助溶试剂,它能断裂分子内和分子间的
当然不一定,比如说你的目的基因的copynumber高或者PCR的效率高都会使得beta-actin的条带不如目的基因的条带亮
注意事项(1)由于与凝胶聚合有关的硅橡胶称、玻璃板表面不光滑洁净,在电泳时会造成凝胶板与玻璃板或硅橡胶条剥离,产生气泡或滑胶;剥胶时凝胶板易断裂,为防止引现象,所用器材均应严格地清洗.硅橡胶条的凹槽、
不论标准品还是待测样品的蛋白质,在形态上都不可能达到理想的刚性标准球状,有的是棒状,有的是椭球状等等,这种形态上的差异导致即使分子质量相同的蛋白质在凝胶中的迁移率也会有所不同.
最大的不同是聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)用的蛋白质不做任何变性处理SDS-PAGE中的SDS是十二烷基磺酸钠,是蛋白质变性剂,SDS能拆散蛋白质的折叠结构,然后沿伸展的多肽链的表面吸附.使肽链带净负
应该是Maker配置有问题,检查一下是否是用的2*buffer配的
可能有几个原因:一:上样缓冲液,用分子克隆上的配方做一次试试看(你所用的缓冲液是不是很久了?)二:如果你染色,脱色都没有问题,PAGE胶是不会说谎的三:不知道你是在哪种波长下所测得有数值?280nm是
这个概念不对吧,SDS-PAGE是聚丙烯酰胺凝胶电泳中最常用的一种.后者是大概含,前者是小类,不可能有什么浓度高或者低的.再问:但我们最近做的实验确实是这样的,SDS-PAGE电极缓冲液离子浓度是活性
SDS-PAGE中样品液和浓缩胶选TRIS/HCL缓冲液,电极液选TRIS/甘氨酸,电泳开始后,HCL解离成氯离子,甘氨酸解离出少量的甘氨酸根离子.蛋白质带负电荷,因此一起向正极移动,其中氯离子最快,
我们经常做这个,是比较基础的东西,你的问题叙述的不是很明确,蛋白多大,用的什么MARKER,跑胶时间,电压,胶浓度是多少都没有交代,而且也没有胶图,仅提几点建议:1.看你的问题,应该是胶浓度太低了,所
我想楼主是不是想问浓缩胶的浓缩原理?不连续系统的凝胶包括浓缩胶和分离胶.浓缩胶的孔径大,分离胶的孔径小.在电场的作用下,蛋白质颗粒在大孔胶中泳动时遇到的阻力小,移动快.而在小孔胶中泳动时遇到的阻力大,
根据文献记载的分子量来判断.或者通过蛋白分离手段将目标蛋白和杂蛋白分开,然后再做电泳
答案是A因为在SDS-PAGE电泳中,SDS(双亲分子)于蛋白质结合,使蛋白变性.SDS-蛋白复合物的形状成长棒状,拉平了蛋白形状的差异,排除D.SDS带负电,一个蛋白上可以结合非常多的SDS分子,使
浓缩胶凝的快没有太大影响,一般三四十分钟就可以.如果怀疑效果,可以检查一下单体是否发生变化,单体要低温避光保存.
你说的灵敏指的是特异性还是灵敏度?SDS-PAGE只是个定性的鉴别方法.特异性上像WB,ELISA方法,原理是抗原抗体反应,能识别特异的蛋白.灵敏度上HPLC一般是作为蛋白纯度指标的检定方法.再问:灵
sds:变性剂,用来变性蛋白和破坏蛋白二级结构.AB:凝胶前体AP和TEMED用来聚合凝胶.SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的英文缩写是sds-page
如果Marker也没有出带,说明电泳及染色有问题,如电泳缓冲液的配制,胶的制备,染色方法等.如果Marker出带而目的片段没有,说明没有目的片段,应该是前期实验的原因.或跑出胶外,说明片段太小,或电泳
聚丙烯酰胺有分子筛效应和电泳效应,而SDS不具有再答:电泳效应
用迁移率算迁移率=蛋白质分子的移动距离:前沿分子的移动距离迁移率(m),蛋白质分子量(M)lg(M)=-bm+k其中b和k为常数也就是说迁移率(m)与蛋白质分子量(M)的对数成反比实验中用已知蛋白质分
发个照片看看.