sds电泳样品为什么要煮沸几分钟,从亚基复性考虑

SDS是阴离子去污剂,作为变性剂和助溶试剂,它能断裂分子内和分子间的氢键,使分子去折叠,破坏蛋白分子的二、三级结构.而强还原剂如巯基乙醇,二硫苏糖醇能使半胱氨酸残基间的二硫键断裂.在样品和凝胶中加入还

电泳的过程中,电极缓冲液中的水分会被蒸发,导致里面的离子浓度升高.加之点解过程中是对里面水的电解,也引起水的减少.离子强度过大,会影响到蛋白质的活性,使电泳速度减慢,条带不清晰.

不需要.使用也不用无菌.只要保证蛋白marker不被蛋白酶降解就行了.

同意楼下,不能看到很明显的条带,有可能是蛋白在提取过程中降解了.建议提取过程中使用蛋白酶抑制剂,低温操作.或者直接用上样缓冲液处理细胞.

Marker中是不需要加上样缓冲液的.

溴酚蓝呈蓝色,而蛋白质是白色,在SDS-凝胶中不明显,再次,溴酚蓝的相对分子量比蛋白质(绝大部分)小,电泳时速度比蛋白质稍快,因此可用作指示,当溴酚蓝到达电泳槽底部(可看蓝色调带),则电泳结束.若无溴

Tricine的作用与Glycine的相似.你看配方中,用Tricine代替Glycine,还得加Tris.这个是用于小分子蛋白电泳的.配起来有些麻烦.你可以找别家公司要一份超低分子量蛋白MARKER

胶没配好吧,没混匀,有气泡,都有可能

你好,有可能是分离胶没有摇匀,导致密度不均；也有可能是两侧上样量有差别导致压力不对称；或是胶没有配齐.希望能帮到您,望采纳

SDS-PAGE是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术.聚丙烯酰胺凝胶由单体丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺聚合而成,聚合过程由自由基催化完成.催化聚合的常用方法有两种：化学聚合法和光聚合法.化学聚

这是一个对照实验.实验组是不密封的那个,对照组是密封的一个.高温可以杀死肉汤中原有的微生物,肉汤成为无菌.把一份放入密闭的容器内,这份肉汤接触不到空气中的细菌.另一个不密封就可以接触到空气中的细菌.经

可能,两种蛋白分子质量和带电量比较接近,分离不开就会产生这种情况,如果通过双向电泳则一般不会出现这种问题

可能有几个原因：一：上样缓冲液,用分子克隆上的配方做一次试试看（你所用的缓冲液是不是很久了?）二：如果你染色,脱色都没有问题,PAGE胶是不会说谎的三：不知道你是在哪种波长下所测得有数值?280nm是

可以考虑如下几个因素1.玻璃是不是洗干净且烘干了2.倒胶时胶是否刚配好混匀,没有凝固3.槽底和四周是否密合,没有漏胶4.水或有机溶液封胶面时,是否沿一侧轻轻加入小心放平5.其它原因,未凝固时剧烈摇动?

电泳缓冲液是Tris-甘氨酸电泳缓冲液.上样缓冲液是SDS缓冲液,需要加入Tris-Hcl,DTT,SDS,溴酚蓝和甘油.分离胶配制过程中的缓冲液是PH8.8的Tris-Hcl浓缩胶配制过程中的缓冲液

根据Marker判断,你样品中最粗的那条带大约21kDa,是表达蛋白诱导出来的吧,恭喜你量很大,不过好像纯化失败?看看你的试剂配制有没有问题.很明显的问题是,您只跑到三分之二,没跑完.而且上样缓冲液中

1.一般来说,加样孔还是足够深的应该有（1cm）,如果觉得比较浅可以多加一点浓缩胶,用来压制胶水平的水或乙醇一点点就可以了.2.如果只是两边的孔走样,中间的没问题的话,两边的孔加样后条带不直,很可能是

作用原理聚丙烯酰胺凝胶电泳是网状结构,具有分子筛效应,它有两种形式,一种是非变性聚丙烯酰胺凝胶,蛋白质在电泳中保持完整的状态,蛋白在其中依三种因素分开：蛋白大小,形状和电荷.而SDS-PAGE仅根据蛋

你说的SDS电泳实际上是SDS-PAGE,SDS只是蛋白变性剂,而凝胶是聚丙烯酰胺.SDS-PAGE和琼脂糖凝胶电泳使用的是完全不同的凝胶材料.SDS－PAGE采用的是聚丙烯酰胺,它是靠化学反应形成的

一般这种情况是上样量太大的缘故,你做PAGE之前有对样品蛋白进行初步定量麽?SDS-PAGE对上扬的蛋白量是有要求的,上样过大就会跑成一片看不到条带.再问：会不会是loadingbuffer放的太多，