SDS蛋白胶跑完半块胶变成黄色是怎么了
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/07/13 23:30:58
不需要.使用也不用无菌.只要保证蛋白marker不被蛋白酶降解就行了.
如果只要蛋白,不需要GSTTag,就挂柱子,用凝血酶把蛋白切下来.如果需要tag,可以用分子筛分离.
跑个电泳看看DNA质量吧,是不是用乙醇沉淀时沉淀的颜色就是黄色的,很有可能是色素,用酚氯仿多抽提几次试试看,实在不行,借个硅胶柱,一般的提取试剂盒里都有,调整好pH和盐浓度,过下柱子,色素一般会吸附到
total:10ml4度下保存:1mol/lTirs-HCl(PH8.8)0.6ml10%SDS2ml50%甘油5ml2-巯基乙醇0.5ml1%溴酚兰1ml水0.9ml另外:SDS不好溶解建议加热溶解
这个倍数是指你的缓冲液母液相比上样时最终浓度的倍数.母液总是要比你的最终浓度高,因为它会被你的蛋白质样品稀释.所以2X就是2倍的母液,与同体积的蛋白质样品混合以后上样.实际操作上,当然不是根据缓冲液体
像绿色荧光蛋白一样,YFP是细胞生物学和分子生物学中一种非常常用的报告基因. 目前,有三种改良的黄色荧光蛋白:citrine,Venus,andYpet.这三种改良的蛋白荧光更亮,更稳定,而且成熟更
一种说法阳离子极化能力增大,共价键极化性增大,颜色加深还有一种说法,原文如下ZnOoccursaswhitepowderknownaszincwhiteorasthemineralzincite.Th
后者比较好,因为特异性强.SDS-PAGE是检测所有的蛋白,有可能你看见的一个条带不止一种蛋白(相同片段的多种蛋白).
SDS-PAGE是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术.聚丙烯酰胺凝胶由单体丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺聚合而成,聚合过程由自由基催化完成.催化聚合的常用方法有两种:化学聚合法和光聚合法.化学聚
沙尘暴会使天空变成黄色还有就是在下雨前,天空中的云层很低,如果在地面有比较强的光源,光线就会被反射.至于为什么是黄色的,主要由地面光源决定,其实很多时侯还会有其他更好看的颜色.
可能有几个原因:一:上样缓冲液,用分子克隆上的配方做一次试试看(你所用的缓冲液是不是很久了?)二:如果你染色,脱色都没有问题,PAGE胶是不会说谎的三:不知道你是在哪种波长下所测得有数值?280nm是
①包涵体加入SDS-PAGE上样品缓冲液后,和缓冲液里的SDS及DTT一起加热会溶解.②如果是为了检测表达产物是可溶还是包涵体,在细胞破碎后离心,将上清及沉淀分别进行电泳,如果目的条带在上清中,则为可
看起来是构象不正确,可能是折叠或修饰的问题.如果只要求可溶,纯化后稀释一下,也许就不沉淀了.也可以试试加一些稳定剂,如甘油,DTT,分子伴侣等.如果要正确折叠的,就比较麻烦,可以用真核表达系统试试.T
一般这种情况是上样量太大的缘故,你做PAGE之前有对样品蛋白进行初步定量麽?SDS-PAGE对上扬的蛋白量是有要求的,上样过大就会跑成一片看不到条带.再问:会不会是loadingbuffer放的太多,
直接放四度.用保鲜膜包好.
胶配的有问题
marker看你买的是什么样的,有的还是粉末状呢,那个用水溶解后也需要加loadingbuffer沸水浴处理的.不过现在卖的很多都是那种直接点样的.说明书一般都有说的,一般10微升.loadingbu
我想你说的应该是肉色吧,淡黄+少量朱红+大量白色,画油画头像的时候如果是在皮肤的背光面可以加一点翠绿再加点环境色
难道不是预显色的marker么如果连marker都没有的话只能是你操作问题了可能是胶配的不好可能是显色的问题
请问蛋白marker染出来没?如果maker都没染出来,加上考马斯亮蓝染色液重复使用的话,八成是染液出问题了,我就遇到过这样的情况,重新配下染色液,过滤后再染胶试试看.(前提是Loadingbuffe