Trizol法提RNA在哪一步可以加Dnase酶
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/08/31 11:32:07
有钱就买invitrogen的咯不然就买天根的吧
是一种试剂,但几乎成了一种方法的代名词.国内的TRIZOL有进口分装的,但价格贵些,有一些是自己做的再问:是不是试剂的混合?再答:是啊。闻闻味道就知道,里面有苯酚。当然,TRIZOL是胍盐提取RNA的
都有吧.只是在最后一步高能态氢(还原性氢)与氧结合生成大量水时放出热量最多!
经典的TRNzol法中有一步是加DNase的.这就是除DNA的一步.CTAB法中是加入LiCl这一步除去的DNA.氯化锂可以选择性沉淀RNA.
要除RNA中的DNA最常用的是DNA酶1,很多公司有买的.但是我们用过发现效果并不好,因为你消化DNA的时候对RNA还是有影响的,所以我不建议这么做.你最好在如何更好的提取RNA上做文章,提高RNA的
厚百提供:1、在提取组织RNA时,每50~100mg组织用1mlTrizol试剂对组织进行裂解;提取细胞RNA时,先离心沉淀细胞,每5-10╳106个细胞加1mlTrizol后,反复用枪吹打或剧烈振荡
TRIzol使样品匀浆化,细胞裂解,溶解细胞内含物,同时因含有RNase抑制剂可保持RNA的完整性.在加入氯仿离心后,溶液分为水相和有机相,RNA在水相中.取出水相用异丙醇沉淀可回收RNA;用乙醇沉淀
定cDNA的量16sRNA?Rrna是看RNA的提取质量的
你的情况可能有两种可能:1.像二楼说的那样,在用酒精洗完沉淀后,干燥过程时间太长,导致RNA不好溶解.但这种情况可像你那样在水浴中加热溶解个10min,一般是会溶的.所以你的问题看起来更像是第二种情况
2.0到2.1都是正常的数值.也有说法说生物越高等,这个比值也相应会大一些,再大那就是有RNA降解了,导致A260升高.你可以看看《RNA分离与鉴定试验指南——RNA研究方法》.这本书对于RNA质量评
http://tools.invitrogen.com/content/sfs/manuals/15596018%20pps%20Trizol%20Reagent%20061207.pdf
可能是叶片中的多糖捣乱.对提取结果不会有太大影响,只要你加入氯仿离心后能分开水相和有机相就行.宁可损失点,别把界面的沉淀物吸出来
RNA自然分解也许受酸碱性影响,用的什么组织?
三、Trizol法提取法(这是提禽流感病毒的步骤,供参考)Trizol法适用于人类、动物、植物、微生物的组织或培养细菌,样品量从几十毫克至几克.1、取鸡胚尿囊液,加入5-10倍体积Trizol液,混匀
Trizol法应该是专门开发出来提取RNA的,但是这个方法用来提取DNA,蛋白效果也很好,你所说的完整性,提取DNA的时候,只要不剧烈振荡,应该还是很好的.给你几个公司的报价:invitrogen公司
1血要新鲜.如果是冻存的,在解冻时要完全,之后再加Trizol.2可以稍多加一些Trizol,少加些血.混匀之后放置10分钟左右,直接加三氯甲烷,混匀再去离心.可以不用先离心去沉淀之后再加三氯甲烷.3
加入LiCl这一步.氯化锂可以选择性沉淀RNA.
冰能提供低温环境,降低几乎无处不在的RNA酶的活性,防止其对所提取的RNA的降解!
硫是热脆硫和铁的生成物在结晶面生成熔点低的化合物磷是冷脆在结晶面生成的是熔点低的化合物硅自己就没了我不是很懂,但是听说过.硅和硫都再问:我说的是铁合金硅铝钡钙合金就你回答了还是谢谢你把硅铝钡钙是一种脱
因为氯仿是有机溶剂与水互不相溶啊!RNA(核糖核“酸”的盐型)是离子化合物,当然是溶于水相.