Trizol法提取烟草RNA为什么CT值很高
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/08/31 10:50:10
有钱就买invitrogen的咯不然就买天根的吧
是一种试剂,但几乎成了一种方法的代名词.国内的TRIZOL有进口分装的,但价格贵些,有一些是自己做的再问:是不是试剂的混合?再答:是啊。闻闻味道就知道,里面有苯酚。当然,TRIZOL是胍盐提取RNA的
博凌科为总RNA提取试剂盒(TRIzol法)使用了经典的TRIzol法总RNA提取试剂,并增添了提取RNA过程中所需要的其它4种组分,1.氯仿;2.异丙醇;3.RNase-freeH2O;4.75%乙
厚百提供:1、在提取组织RNA时,每50~100mg组织用1mlTrizol试剂对组织进行裂解;提取细胞RNA时,先离心沉淀细胞,每5-10╳106个细胞加1mlTrizol后,反复用枪吹打或剧烈振荡
烟草花叶病毒核酸是单链RNA,双链RNA病毒:双核糖核酸病毒科,呼肠孤病毒(Re-ovirus),奥尔比病毒,葡萄卷叶病病毒等
TRIzol使样品匀浆化,细胞裂解,溶解细胞内含物,同时因含有RNase抑制剂可保持RNA的完整性.在加入氯仿离心后,溶液分为水相和有机相,RNA在水相中.取出水相用异丙醇沉淀可回收RNA;用乙醇沉淀
2.0到2.1都是正常的数值.也有说法说生物越高等,这个比值也相应会大一些,再大那就是有RNA降解了,导致A260升高.你可以看看《RNA分离与鉴定试验指南——RNA研究方法》.这本书对于RNA质量评
http://tools.invitrogen.com/content/sfs/manuals/15596018%20pps%20Trizol%20Reagent%20061207.pdf
可能是叶片中的多糖捣乱.对提取结果不会有太大影响,只要你加入氯仿离心后能分开水相和有机相就行.宁可损失点,别把界面的沉淀物吸出来
RNA自然分解也许受酸碱性影响,用的什么组织?
异丙醇是沉淀核酸用的,作用和乙醇一样.只不过用量少一点,0.6V~1V就够了,不像乙醇沉淀需要至少2V,一般需要2.5倍体积.在水相很多,离心管容积有限,加不下太多乙醇的时候一般会用异丙醇沉淀.异丙醇
我做过Trizol法提取RNA实验,在这方面之前也有困惑,不过查了很多资料后才知道:Trizol提取的RNA用DEPC处理的水溶解的话,A280/A260比值为1.4、1.5左右比较正常,若用TE溶解
三、Trizol法提取法(这是提禽流感病毒的步骤,供参考)Trizol法适用于人类、动物、植物、微生物的组织或培养细菌,样品量从几十毫克至几克.1、取鸡胚尿囊液,加入5-10倍体积Trizol液,混匀
Trizol法应该是专门开发出来提取RNA的,但是这个方法用来提取DNA,蛋白效果也很好,你所说的完整性,提取DNA的时候,只要不剧烈振荡,应该还是很好的.给你几个公司的报价:invitrogen公司
有一种可从少量组织和细胞中同时回收DNA、RNA和蛋白质的一步法,这种方法包括用含异硫氰酸胍和酚的一种单相液来裂解细胞,加入氯仿产生第二相,DNA和蛋白质在有机相中被抽提,RNA则被留在上层水相中.用
1血要新鲜.如果是冻存的,在解冻时要完全,之后再加Trizol.2可以稍多加一些Trizol,少加些血.混匀之后放置10分钟左右,直接加三氯甲烷,混匀再去离心.可以不用先离心去沉淀之后再加三氯甲烷.3
冰能提供低温环境,降低几乎无处不在的RNA酶的活性,防止其对所提取的RNA的降解!
因为氯仿是有机溶剂与水互不相溶啊!RNA(核糖核“酸”的盐型)是离子化合物,当然是溶于水相.
只要是纯度高的RNA可以保存很久的,我有保存过1年零两个月的,在做实验的时候基本没有降解,只是放时间常了需要进行下处理.不过正常实验用没问题.
-80保存的生物样本用于提取RNA是没有问题的,一般你可以在-80的冰箱里存个一两年都能提出不错的RNA.再问:那需要什么处理吗?比如离心、利用Trizol提取RNA需要提前处理吗?还是直接冰冻全血?