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荧光定量PCR技术中的扩增效率什么意思
来源:学生作业帮 编辑:
作业帮
分类:
综合作业
时间:2024/10/04 18:55:30
荧光定量PCR技术中的扩增效率什么意思
PCR原理中,反应一个循环,PCR产物扩增一倍,即为之前的2倍.……反应N个循环,理论上应为原来的2的N次方.此时,理论的扩增效率是100%,即1.
但实际上,由于酶,dNTPs,引物,模板等因素,扩增效率达不到100%.
因此,我们就要做标准曲线,看实际的扩增效率是多少,也就是标准曲线的斜率.理论上100%的扩增效率,换算出来的斜率是-3.32.
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我做荧光定量PCR标准曲线时,斜率只有-1.25,扩增效率E很高.为什么呢?
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请问荧光定量PCR进行相对定量时,若是目的基因和内参基因扩增效率不一致,为什么会导致结果的不准确?
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