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western blot实验怎么上样

来源：学生作业帮 编辑：作业帮 分类：生物作业 时间：2024/11/09 03:40:35
western blot实验怎么上样
western blot实验怎么进行上样呢?就是每个孔该加些什么,因为从来没接触过这个实验,所以很迷茫呀!
首先要设计上样的顺序,一般是让与抗体有反应的样品和没有反应的样品间隔开,这样条带之间反差比较明显.比如你的检测样能够与抗体反应,上样就是maker—阳性对照—阴性对照—检测样(N个),如果检测样比较多,可以在检测样后再加上一个阴性对照和阳性对照.
上样量一般5-20微升(样品与上样buffer混合后),可以先做个普通的染色,看看条带有没有溢出,如果溢出了就上少点,太浅就上多点.
都调整好了再继续做转印.
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