如何确定pcr反应中的退火温度和延长时间

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：数学作业时间：2024/07/18 15:07:13

退火温度一般是比你设计引物时的tm值低5度.不过这是要摸索的,用温度梯度PCR.（顺便说一下,如果你不想花时间摸索温度,建议就用60度.这个温度是我原来做实验时的万能温度.尤其对较短片段PCR适用）
延长时间是看PCR产物长度,一般认为常规taq酶一分钟扩增1kb.比如你的PCR产物是500bp,你就用30秒.不过我一般会在这个基础上再加5秒左右.

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