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如何制作纳豆激酶活性测定中所使用的硼酸生理盐水缓冲液

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:综合作业 时间:2024/11/08 14:02:05
如何制作纳豆激酶活性测定中所使用的硼酸生理盐水缓冲液
溶液制备
1、Borate buffer(0.05M pH8.5) 9.54g Sodium Borate•10H2O+4.5g NaCl溶于二次蒸馏水450ml用HCl(6M)调整pH值至8.5然后用二次蒸馏水定容至500ml.
2、TCA Solution(0.2M) 16.34g TCA用二次蒸馏水溶解定容至500ml.
3、Dilution buffe 0.177g CaSO4•2H2O+0.292g NaCl+1ml Sodium acetate buffer(1M)+0.25ml TritonX-100(10%)用二次蒸馏水溶解定容至500ml.
4、Sodium acetate buffer(1M) 12.96g Sodi um acetate加50ml二次蒸馏水溶解并以1M醋酸调整pH值至6.0,然后用二次蒸馏水溶解定容至100ml.
5、TritonX-100(10%) 5.0g TritonX-100加45ml二次蒸馏水溶解.
6、Fibrinogen solution 0.144g Fibrinogen+20ml Borate buffer 充分溶解30min后滤纸过滤即得.
7、Thrombin solution 将5000IU Thrombin溶于10ml 0.85%NaCl solution,充分溶解(需-80℃下保存).吸取0.2ml与4.8ml Borate buffer混合即得(临配新用).
8、NaCl solution(0.85%)0.85g NaCl充分溶于100ml二次蒸馏水即得.
9、样品溶液 根据样品活性精密称取样品适量用Dilution buffer稀释至适当浓度,即得.