简述用T-克隆载体进行PCR产物克隆的原理

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：生物作业时间：2024/11/08 23:40:37

T克隆的原理是基于常规PCR反应中所使用Taq聚合酶能够在PCR产物的3‘末端非特异性添加一个A,这样实际上常规PCR产物都含有3端突出一个A的粘性末端.基于这个原理,常规的线性T－克隆载体（PUC18和PUC19等）在其3’末端添加一个T,这样的载体能够和任何PCR产物进行连接克隆,并不需要添加任何特异性的粘性末端位点.这个就是T克隆的原理了.

如何确保pcr产物以正确的方向克隆到表达载体中 (未翻译方向) 从克隆载体上PCR出目的基因原理 T载体克隆为什么要用cDNA 基因克隆实验克隆实验问题 1、以cDNA为模板做PCR反应,得到的产物和预期的长度一样.2、再用pMD-19载体连接目的用pmd-18t载体克隆基因,能用M13测序吗 TA克隆时,如何选择T载体? 双酶切老是切不完全我PCR克隆了一段200bp的基因片段,然后连接到了T载体,引物2端各有EcoRI和HindIII的酶关于克隆的问题.假如我有有一个基因片段,未知序列.我可以把它连接到T载体,然后PCR 目的基因未连接到克隆载体上这是为什么?我用的克隆载体是PMD-18! 菌液PCR不同条带将已扩增出来的993bp的cDNA与T载体连接,之后DH5α转化,涂平板,挑克隆!菌液PCR为何一组检关于PCR克隆基因的引物问题用PCR合成DNA属于克隆吗