作业帮做ELISA时要用到TMB显色液,怎么配制?效果怎么样?有人试过没有?
来源：学生作业帮 编辑：作业帮 分类：化学作业 时间：2024/06/28 10:53:51
做ELISA时要用到TMB显色液,怎么配制?效果怎么样?有人试过没有?
配方一：
底物显色A液：醋酸钠13.6g ,柠檬酸1.6g,30%双氧水0.3ml,蒸馏水加至500ml.
底物显色B液 :乙二胺四乙酸二钠0.2g,柠檬酸0.95g,甘油 50ml,取0.15g TMB溶于3mlDMSO中,蒸馏水加至500ml.
使用的时候根据需要量取等量AB液混匀后使用
配方二：
底物缓冲液(pH 5.0磷酸钠柠檬酸)：0.2 mol/L Na2HPO425.7 ml,0.1 mol/L柠檬
酸24.3 mL,50mL蒸馏水
TMB(四甲基联苯胺)使用液：0.5 ml 2 mg/mL TMB无水乙醇溶液,10 mL底物
缓冲液,32μL30% H2O2混合,现用现配.
将底物缓冲液与TMB使用液按1：1混匀即可,现用现配.
怎么配方这么多啊?配方一很复杂啊,这两个配方实际效果怎么样?你们用过吗?还有其他方案吗?还有这些溶液储存条件是怎么样的?
配方一：
底物显色A液：醋酸钠13.6g ,柠檬酸1.6g,30%双氧水0.3ml,蒸馏水加至500ml.
底物显色B液 :乙二胺四乙酸二钠0.2g,柠檬酸0.95g,甘油 50ml,取0.15g TMB溶于3mlDMSO中,蒸馏水加至500ml.
使用的时候根据需要量取等量AB液混匀后使用
配方二：
底物缓冲液(pH 5.0磷酸钠柠檬酸)：0.2 mol/L Na2HPO425.7 ml,0.1 mol/L柠檬
酸24.3 mL,50mL蒸馏水
TMB(四甲基联苯胺)使用液：0.5 ml 2 mg/mL TMB无水乙醇溶液,10 mL底物
缓冲液,32μL30% H2O2混合,现用现配.
将底物缓冲液与TMB使用液按1：1混匀即可,现用现配.
怎么配方这么多啊?配方一很复杂啊,这两个配方实际效果怎么样?你们用过吗?还有其他方案吗?还有这些溶液储存条件是怎么样的?
第一个配方就很好,经典的AB法,效果不错,现在大多数实验室自己配的就是这个,有一点要注意的就是如果你用的TMB是TMB.2HCL就可以不用DMSO溶解,直接用水定容就可以.
您好 您的TMB显色液的配制方法可以告诉我吗
求经过您亲自验证的Elisa中TMB显色系统的配置方法
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