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质粒酶切我最近在做连接,总是连不上,所以我想分析是哪步出问题.我想将酶切完的质粒载体与未酶切的质粒跑电泳看是否酶切成功,

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:综合作业 时间:2024/10/05 01:32:02
质粒酶切
我最近在做连接,总是连不上,所以我想分析是哪步出问题.我想将酶切完的质粒载体与未酶切的质粒跑电泳看是否酶切成功,但不知道跑电泳能不能分辨出来(质粒大小10kb-12kb),如果可以,琼脂糖浓度是多少.
应该能的,没有酶切的载体有很大一部分是超螺旋的,会跑得比本来的大小快,酶切结束后就线性化了.
你在做连接时加一个只加载体不加insert的对照,如果对照不长的话证明载体切得没问题.你就多做几个载体和Insert的比例,4度连接过夜,一定能长.
另外,insert可以多加一点