为什么筛选受体细胞时根据抗性基因而不是目的基因
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:语文作业 时间:2024/09/02 10:19:06
为什么筛选受体细胞时根据抗性基因而不是目的基因
==看来是我的问题没有表述清楚啊。
生物选修3里关于基因工程的步骤有5步,第4步是筛选含有目的基因的受体细胞(利用抗性基因即标记基因),第5步是目的基因的表达。我的意思是,为什么第四步不能用目的基因来筛选符合条件的受体细胞(如通过DNA分子杂交,检验表达产物这些方法)?
==看来是我的问题没有表述清楚啊。
生物选修3里关于基因工程的步骤有5步,第4步是筛选含有目的基因的受体细胞(利用抗性基因即标记基因),第5步是目的基因的表达。我的意思是,为什么第四步不能用目的基因来筛选符合条件的受体细胞(如通过DNA分子杂交,检验表达产物这些方法)?
这里最重要的是要区别基因工程中出现的最后未成功的两种情况.一种是:目的基因导入了受体细胞但却没表达.(目的基因不是只要导入受体细胞就能表达的,它本身的表达要受到一些修饰部位影响).第二种是:目的基因根本没有导入受体细胞.
抗性基因一般是位于运载体上,它属于标记基因.选择运载体时它必需要有合适的标记基因,就是因为标记基因的目的就是通过它判断重组DNA(目的基因和运载体结合的物质)是否导入了受体细胞.(如第4步中,如果表现有抗性,说明重组DNA已经进入了受体细胞,否则受体细胞不会表现出抗性.)
如果导入了受体细胞,最后就要看目的基因是否表达了,此时就是你说的第5步了.看有没有相应的蛋白质或出现相应的性状,甚至用杂交方法看有没有形成相应的mRNA.
再问: 按照你的说法,就是第一次检验的是是否导入,第二次检验的是是否成功表达。既然最终目的是筛选有目的基因导入受体细胞而且目的基因能够成功表达的细胞,那为什么不能第四步就直接通过观察目的基因是否成功表达来筛选(如果没导入就肯定不会表达了对吧)
再答: 这样做是为了基因工程最后能成功做铺垫的。如果最后没有表达出相应的性状,假如第4步没做,那我们就不知修正哪个环节,是目的基因根本没导入还是导入没表达?如果没导入可能我们就要对运载体导入环节进行修正,如果是导入没表达,可能我们就要对目的基因进行修饰让它得以表达。 清楚了吗?如果不清楚,我们继续探讨。
抗性基因一般是位于运载体上,它属于标记基因.选择运载体时它必需要有合适的标记基因,就是因为标记基因的目的就是通过它判断重组DNA(目的基因和运载体结合的物质)是否导入了受体细胞.(如第4步中,如果表现有抗性,说明重组DNA已经进入了受体细胞,否则受体细胞不会表现出抗性.)
如果导入了受体细胞,最后就要看目的基因是否表达了,此时就是你说的第5步了.看有没有相应的蛋白质或出现相应的性状,甚至用杂交方法看有没有形成相应的mRNA.
再问: 按照你的说法,就是第一次检验的是是否导入,第二次检验的是是否成功表达。既然最终目的是筛选有目的基因导入受体细胞而且目的基因能够成功表达的细胞,那为什么不能第四步就直接通过观察目的基因是否成功表达来筛选(如果没导入就肯定不会表达了对吧)
再答: 这样做是为了基因工程最后能成功做铺垫的。如果最后没有表达出相应的性状,假如第4步没做,那我们就不知修正哪个环节,是目的基因根本没导入还是导入没表达?如果没导入可能我们就要对运载体导入环节进行修正,如果是导入没表达,可能我们就要对目的基因进行修饰让它得以表达。 清楚了吗?如果不清楚,我们继续探讨。
1、筛选含有目的基因的受体细胞
请问 标志基因为什么能筛选目的基因已注入受体细胞的细胞,过程是怎样的的?
假如目的基因插入了质粒的四环素抗性基因中,筛选含目的基因的细胞,这个质粒还含有抗氨苄霉素基因.
为什么载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞?
如何筛选具有目的基因的运载体,是运载体,不是受体细胞.
为什么导入受体细胞的目的基因可能不表达
目的基因导入受体细胞后,为什么不算发生基因突变
1 书上说 标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因 从而将含有目的基因的细胞筛选出来
目的基因和运载体重组完是筛选含有目的基因的DNA吗 还是将重组DNA导入受体细胞在筛选
目的基因如何进入受体细胞?
D.载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达对吗?
将目的基因导入受体细胞时山羊受体细胞一般是乳腺细胞,棉花受体细胞一般都可以