蛋白质洗脱曲线的分析这是阴离子交换柱层析分离纯化蔗糖酶的洗脱曲线,请问这个曲线怎么分析呢?看着无从下手啊~是离子交换柱层
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/07/07 12:58:29
蛋白质洗脱曲线的分析
这是阴离子交换柱层析分离纯化蔗糖酶的洗脱曲线,请问这个曲线怎么分析呢?看着无从下手啊~
![](http://img.wesiedu.com/upload/3/f1/3f15099d5f52811530db26e545804aaa.jpg)
是离子交换柱层析,打错字了==
这是阴离子交换柱层析分离纯化蔗糖酶的洗脱曲线,请问这个曲线怎么分析呢?看着无从下手啊~
![](http://img.wesiedu.com/upload/3/f1/3f15099d5f52811530db26e545804aaa.jpg)
是离子交换柱层析,打错字了==
从曲线中可以看出,几个蛋白质的峰值出现在11管、30管、37管、41管、76管,其中76管的峰值最大,而这几个峰值对应的NaCl的浓度在0.6-0.8之间,76管对应的是0.8.所谓出峰,就是蛋白含量相对较高.这个曲线告诉你,在NaCl的浓度在0.6-0.8时,蛋白质的含量较高,你可在对应的试管数收取你的目的蛋白,然后在通道蛋白电泳等手段检测你的目的蛋白.
我以前做过蛋白的纯化,但是对于洗脱曲线的分析不是很在行,但我想原理是差不多的,
再问: 那这里直线下方的曲线的意思是什么呢?
再答: 随着浓度的下降,吸光值在减少,吸光值的减少基本可以等同于蛋白的减少。这个曲线,最主要是要看出峰的管数和出峰时氯化钠的浓度。 感觉你对这个了解的很少,建议还是多看看相关的书籍,不然光靠别人的讲解,你很难理解其中的含义。
再问: 我确实了解挺少的。。。 不过你可不可以再明确一下,氯化钠那条直线下方的曲线部分的意思呢?其实我想知道为什么一定要画出那一条直线唉T_T谢谢。。。
再答: 那条直线其实图中已经有标示了,代表氯化钠的浓度。氯化钠从0到0.8的变化过程中,蛋白的吸光值从0到到0.5的变化,没一个峰值(管数)你做一条平行的直线与氯化钠的那条斜线相交所得的点,即为该峰值(管数)所需要的氯化钠的浓度。 可以这么说,这条斜线没有太大的意义,有没有都可以找出峰值所对应的氯化钠的浓度。
我以前做过蛋白的纯化,但是对于洗脱曲线的分析不是很在行,但我想原理是差不多的,
再问: 那这里直线下方的曲线的意思是什么呢?
再答: 随着浓度的下降,吸光值在减少,吸光值的减少基本可以等同于蛋白的减少。这个曲线,最主要是要看出峰的管数和出峰时氯化钠的浓度。 感觉你对这个了解的很少,建议还是多看看相关的书籍,不然光靠别人的讲解,你很难理解其中的含义。
再问: 我确实了解挺少的。。。 不过你可不可以再明确一下,氯化钠那条直线下方的曲线部分的意思呢?其实我想知道为什么一定要画出那一条直线唉T_T谢谢。。。
再答: 那条直线其实图中已经有标示了,代表氯化钠的浓度。氯化钠从0到0.8的变化过程中,蛋白的吸光值从0到到0.5的变化,没一个峰值(管数)你做一条平行的直线与氯化钠的那条斜线相交所得的点,即为该峰值(管数)所需要的氯化钠的浓度。 可以这么说,这条斜线没有太大的意义,有没有都可以找出峰值所对应的氯化钠的浓度。
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