为什么琼脂糖胶和PAGE胶检测结果不一致
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/07/05 19:50:15
为什么琼脂糖胶和PAGE胶检测结果不一致
首先两种胶的分辨度是不同的,如果PAGE可以看到条带,你可以加大琼脂糖上样量;还有一种可能,PAGE是染色显色,而琼脂糖是EB等核酸染料的作用,你可以检查下你们用的EB ,最好是进口的.
再问: 琼脂糖检测到有而PAGE胶上没有
再答: 首先是它们的介质不一样,琼脂糖凝胶配胶很方便,聚丙烯酰胺胶配起来较麻烦。 一般跑琼脂糖胶用TAE缓冲液,而跑聚丙烯酰胺胶用TBE缓冲液;不同浓度的琼脂糖凝胶适合于跑大于80bp 的DNA和RNA,聚丙烯酰胺胶则适合跑较小分子的DNA和RNA,一般几bp到几百bp的片段都可用聚丙烯酰胺胶进行电泳。 理论上聚丙烯酰胺胶的分辨率远远高于琼脂糖胶,可以分辨出单个碱基因的差异,如单链构象多态性就是通过跑聚丙烯酰胺胶而实现的。 因此分析你的问题,可能是DNA片段长度的问题。
再问: 请问PAGE胶染出来颜色很浅可能是什么原因喃,是用伯乐的测序电泳槽跑的?谢谢……
再问: 琼脂糖检测到有而PAGE胶上没有
再答: 首先是它们的介质不一样,琼脂糖凝胶配胶很方便,聚丙烯酰胺胶配起来较麻烦。 一般跑琼脂糖胶用TAE缓冲液,而跑聚丙烯酰胺胶用TBE缓冲液;不同浓度的琼脂糖凝胶适合于跑大于80bp 的DNA和RNA,聚丙烯酰胺胶则适合跑较小分子的DNA和RNA,一般几bp到几百bp的片段都可用聚丙烯酰胺胶进行电泳。 理论上聚丙烯酰胺胶的分辨率远远高于琼脂糖胶,可以分辨出单个碱基因的差异,如单链构象多态性就是通过跑聚丙烯酰胺胶而实现的。 因此分析你的问题,可能是DNA片段长度的问题。
再问: 请问PAGE胶染出来颜色很浅可能是什么原因喃,是用伯乐的测序电泳槽跑的?谢谢……
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