小片段DNA的PCR扩增程序

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：综合作业时间：2024/07/16 15:56:12

小片段DNA的PCR扩增程序
我要扩的DNA片段138KB扩了很多次都没有扩出来,想问问大家,谁扩过这么小的片段,PCR程序是怎么设定的
本人要扩增的是138bp的小DNA,怎么也扩不出来,不知道该怎么办.我的上游引物是5-3 CGAAGCTTAGATTAATAGTTTTAGCTATTAATC TM值是58.33 下游引物是5-3 GCGTCGACCCTAGTATAGCATTTTGTGAAG TM值是64.77 有谁可以帮我设计一下程序

你的引物设计得不是很好,2个Tm值不协调.
但是已经这样了,我建议你优化退火温度：
先设计53、55、57、59（或60）4组,之后如果有迹象,在那个出来条带的温度附近再细化一下,再次优化温度,比如,如果你在55度出来带了,再设计54、55、56试试看,也许就会很好了.
好运!

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