我用PCR测序方法找到一些SNP,现在想用荧光定量RT-PCR的溶解曲线法进行验证,请问各位大师如何操作呢?

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：综合作业时间：2024/11/09 09:55:11

我用PCR测序方法找到一些SNP,现在想用荧光定量RT-PCR的溶解曲线法进行验证,请问各位大师如何操作呢?
我知道用探针法是最好的,但是设计探针花费太高,老板不愿意,所以想用溶解曲线法,如有哪位高手做过或懂的,请赐教,不胜感激.

可以先将SNP位点附近的区域用PCR扩增出来,再在这个上设计引物,直接P或者克隆到质粒上在P.
俺也就建议一下哈,你可以讲SNP位点设计在引物的3'端附近,然后计算扩增效率.估计看溶解曲线比较难看出来.

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