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PCR模板为基因组DNA,一引物两侧有30bp反向互补序列,如何调整PCR程序?

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/08/31 07:49:43
PCR模板为基因组DNA,一引物两侧有30bp反向互补序列,如何调整PCR程序?
引物两侧指的是模板上是序列,不是引物本身。
模板退火时会不会形成发夹结构?我用两步法试了一下,还是P不出来。我现在只想把目的带P出来,有杂带可以接受。
不在引物上,应该没啥问题.如果PCR产物特异性差,建议适当提高退火温度或者换用保真度高的酶.
如果非要认为模板特殊结构有影响的话,不妨试着调整一下PCR 缓冲液的成分,针对不同的结构有专用缓冲液.