在细菌染色体dna提取过程中怎么样除去质粒dna?
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/11/07 22:45:00
在细菌染色体dna提取过程中怎么样除去质粒dna?
①差速离心,可以将两种DNA分离
②凝胶电泳,分离开两种DNA后,将迁移最慢的条带(染色体DNA)剪下,用洗脱液洗脱下来.
③碱变性裂解法,细菌悬浮液在高碱性条件下,染色体和蛋白质变性,质粒DNA由于其超螺旋共价闭合结构,双链不会分离,再以PH4.8的高盐缓冲液调节其PH至中性,质粒DNA可再度复性,其速度比染色体DNA复性快,重新溶于溶液,而染色体DNA复性慢,并且易与变性的蛋白质纠缠沉淀,短时间内离心可分离到粗染色体DNA,而后除去蛋白质和RNA就可得到染色体DNA .
②凝胶电泳,分离开两种DNA后,将迁移最慢的条带(染色体DNA)剪下,用洗脱液洗脱下来.
③碱变性裂解法,细菌悬浮液在高碱性条件下,染色体和蛋白质变性,质粒DNA由于其超螺旋共价闭合结构,双链不会分离,再以PH4.8的高盐缓冲液调节其PH至中性,质粒DNA可再度复性,其速度比染色体DNA复性快,重新溶于溶液,而染色体DNA复性慢,并且易与变性的蛋白质纠缠沉淀,短时间内离心可分离到粗染色体DNA,而后除去蛋白质和RNA就可得到染色体DNA .
细菌细胞中,染色体DNA和质粒DNA在质粒提取过程中发生了什么变化?该变化对质粒检测和分离有什么利用价值
为什么能在细菌破碎后的细菌提取液中分离到质粒DNA
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