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用18s rRNA做RT-PCR的内参时,可以用oligo dT做反转录吗?

来源：学生作业帮 编辑：作业帮 分类：综合作业 时间：2024/09/01 10:30:40
用18s rRNA做RT-PCR的内参时,可以用oligo dT做反转录吗?
这个是不行的,需要用random primers来做反转录引物.
oligo dT适合真核生物的mRNA的反转录,而这个 rRNA不同于mRNA,没有polyA尾巴,因此用oligo dT是不能反转录出rRNA的.
反转录RT-PCR的内参如何选择? 我买的RT-PCR两步法试剂盒里有随机引物还有Oligo(dT)用哪个好呢 请问,我反转录时设置了2个循环,cdna还可以做半定量PCR吗?Actin的pcr在500bp单一条带. rp49基因是什么基因,很多做半定量PCR的用这个基因做内参,想了解下该基因是否是rRNA qRT-PCR检测植物miRNA的表达量,内参基因选择什么最好?可以给出特意反转录引物和qRT-PCR的引物吗? 请问,GAPDH作为RT-PCR内参的原理是什么呀?我知道为什用它做内参了,就是不清楚怎么用它, 提取植物总RNA,是包括了mRNA,rRNA,tRNA吗?那mRNA应该也是有很多种吧?那用olig(dT）反转录得到什 RT-PCR中内参蛋白GAPDH和b-actin人和小鼠的可以用同一对引物吗? 做RT-PCR时,上下引物退火温度一定要一样吗?内参条带很亮,为什么没有目的基因? 做RT-PCR内参的作用是什么?应该如何选择管家基因啊? 做RT-PCR内参的作用是什么?应该如何选择管家基因 我做的RT-PCR怎么样让内参一致?刚入门 老板让做内参的条件 反复做也没有要P出来的目的条带 我的退火温度是55 可以