蛋白质印迹法中为什么不直接在1抗中作标记而在2抗中作标记,这不是多此一举么?先谢过了!
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:语文作业 时间:2024/08/28 16:00:24
蛋白质印迹法中为什么不直接在1抗中作标记而在2抗中作标记,这不是多此一举么?先谢过了!
是这样的:如果一抗上直接加标记,不但不能保证抗体抗原反映的特异性,也不能保证实验的可重复性.
首先,由于抗体都是人工去设计的,对于一个人工设计的蛋白质来说,你可以设计一个很好的抗体与他结合;然而对于天然蛋白质,你不能保证一个很高的识别率和准确度.所以,针对1抗,我们可以设计出完美的2抗,然而针对原蛋白质,你无法设计一个特别完美的1抗.所以,直接标记1抗的出来的结果是不准确的,而标记2抗是相对于1抗直接标记来说更准确的,所以经过大量的实验之后人们抛弃了直接标1抗的方法.当然,标2抗也不是完全完美的,当然你也可以标3抗,4抗,不过那个成本就指数上升了,在保证一定的置信度的情况下,人们一般标到2抗就够了.
其次,对于同一个抗原,不同来源的1抗所识别的位置可能会有很大差异.这样,你就无法保证试验的可重复性.而1抗作为抗原来讲,可以将它的抗原决定簇设计的一样,这样针对不同的1抗,2抗是可以保证差不多一个样子的.而且这也给节约成本和方便标记带来了方便.
所以一般现在都是2步标记,第一个原因是主要的,第二个原因是次要的.希望对你有帮助.
首先,由于抗体都是人工去设计的,对于一个人工设计的蛋白质来说,你可以设计一个很好的抗体与他结合;然而对于天然蛋白质,你不能保证一个很高的识别率和准确度.所以,针对1抗,我们可以设计出完美的2抗,然而针对原蛋白质,你无法设计一个特别完美的1抗.所以,直接标记1抗的出来的结果是不准确的,而标记2抗是相对于1抗直接标记来说更准确的,所以经过大量的实验之后人们抛弃了直接标1抗的方法.当然,标2抗也不是完全完美的,当然你也可以标3抗,4抗,不过那个成本就指数上升了,在保证一定的置信度的情况下,人们一般标到2抗就够了.
其次,对于同一个抗原,不同来源的1抗所识别的位置可能会有很大差异.这样,你就无法保证试验的可重复性.而1抗作为抗原来讲,可以将它的抗原决定簇设计的一样,这样针对不同的1抗,2抗是可以保证差不多一个样子的.而且这也给节约成本和方便标记带来了方便.
所以一般现在都是2步标记,第一个原因是主要的,第二个原因是次要的.希望对你有帮助.
标记生物细胞中的核酸.而不标记蛋白质.应标记的同位元素是
怎么在分子印迹聚合物上进行荧光标记
生物中同位素标记法为什么用S35标记蛋白质,P32标记DNA哪?
在噬菌体侵染细菌的实验中,为何不直接标记噬菌体?
origin中做xrd图,在峰上面做标记后,copypage到wrod中.峰会变高.和标记连在一起了 这是为什么?
(生物高手请进)如果仅标记生物细胞中的核酸,而不标记蛋白质,应使用的同位素是?
现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记在转基因技术中,这种蛋白质的作用是
T2 噬菌体的问题只用P32,S35标记噬菌体而不标记 细菌问为什么得到的子一代中只有一部分的子代有标记?
如果用P32 S35来标记噬菌体而不标记宿主细胞,为什么只有部分子代噬菌体的核酸中有P32标记
如果仅要求标记生物细胞中的蛋白质 不标记核酸,应选用的同位素是?
放射自显影技术是生物学研究中常用的手段,如果仅要求标记生物细胞中的核酸,而不标记蛋白质,应运用的同位素是( )
放射自显影技术是生物学研究中常用的手段,如果仅要求标记生物细胞中的蛋白质,而不标记核酸,应运用的同位素是( )