应用COS质粒载体克隆外源基因的一般程序是什么?
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/08/23 07:06:24
应用COS质粒载体克隆外源基因的一般程序是什么?
满意答案噓、偸偸噯伱1级2008-10-26答:应用柯斯质粒作为载体克隆外源基因的一般程序是,先用特定的限制性核酸内切酶局部消化真核生物的DNA,产出相对分子质量较大的外源DNA片段,与经同样的限制酶切割过的柯斯质粒线形DNA分子进行体外连接反应.由此形成的连接产物群体中,有一定比例的分子两端各带一个cos位点、中间DNA片段长度在40kb左右的重组体,这样的分子同λ噬菌体感染晚期所产生的分子类似.当与λ噬菌体包装连接物混合时,Ter体系能识别并切割这种两端由cos位点围着的34―45kb长的真和片段,并把这些分子包装进r噬菌体头部,进而形成“噬菌体”颗粒.当然,只具有噬菌体外壳是不能作为噬菌体生存的,用它在感染寄主细胞,可将真核DNA―cos杂种分子注入细胞内,并通过cos位点环化起来.作为质粒载体,又可按质粒分子的方式进行复制和表达抗药性标记.Iしovのyou 的感言:
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