液相梯度洗脱设置问题举个例子时间 A B0 80 2010 80 2010.1 80 2030 80 20最后30分钟那
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:综合作业 时间:2024/10/05 05:43:52
液相梯度洗脱设置问题
举个例子
时间 A B
0 80 20
10 80 20
10.1 80 20
30 80 20
最后30分钟那个设置应该是平衡柱子,那10分钟和10.1分钟那个设置意义是什么呢?都是一样溶剂比例设10.1分钟那个是为什么?(可能我设置有问题,就想问问有时候设置的比前一个时间多0.1分钟是干嘛的?)不知道我表述清楚没,刚接触不太懂
举个例子
时间 A B
0 80 20
10 80 20
10.1 80 20
30 80 20
最后30分钟那个设置应该是平衡柱子,那10分钟和10.1分钟那个设置意义是什么呢?都是一样溶剂比例设10.1分钟那个是为什么?(可能我设置有问题,就想问问有时候设置的比前一个时间多0.1分钟是干嘛的?)不知道我表述清楚没,刚接触不太懂
,你说能看明白.你举这个例子不是特别的恰当了.我给我举个例子,
时间 A B
0 80 20
10 10 90
14 10 90
14.1 80 20
20 80 20
这个例子能说明你的问题,前面0-10分钟采用的梯度是等比例的把A80%和B20%变换成A10%和B90%,而当10分钟时,已经变换成了A10%和B90%,这只是梯度变换成了这个比例,实际上,因为液相色谱的死时间问题,在柱子中的比例还没到这样的比例,再就是现在这个比例应该是有机相最多的时候,这时会把一些难于洗脱的物质洗脱出来,一般还需要几分钟的时间吧,然后过了四分钟,觉得洗脱完全了,就在14.1分钟立即把梯度换成了A80%和B20%,接下来其实现在已经不在分析样品了,是在平衡系统了.在实际运行中,我做的这个梯度只有14分钟再加上大约2分钟的死时间,也就是说大约16分钟的时间是整个样品中的谱图正常时间,16分钟之后不可能再有峰出来了,如果有峰说明方法梯度设置有问题了.
而你上面的梯度其实是个等度,设置这个梯度没意义,可以都删除,直接在AB泵上设置就行了.
时间 A B
0 80 20
10 10 90
14 10 90
14.1 80 20
20 80 20
这个例子能说明你的问题,前面0-10分钟采用的梯度是等比例的把A80%和B20%变换成A10%和B90%,而当10分钟时,已经变换成了A10%和B90%,这只是梯度变换成了这个比例,实际上,因为液相色谱的死时间问题,在柱子中的比例还没到这样的比例,再就是现在这个比例应该是有机相最多的时候,这时会把一些难于洗脱的物质洗脱出来,一般还需要几分钟的时间吧,然后过了四分钟,觉得洗脱完全了,就在14.1分钟立即把梯度换成了A80%和B20%,接下来其实现在已经不在分析样品了,是在平衡系统了.在实际运行中,我做的这个梯度只有14分钟再加上大约2分钟的死时间,也就是说大约16分钟的时间是整个样品中的谱图正常时间,16分钟之后不可能再有峰出来了,如果有峰说明方法梯度设置有问题了.
而你上面的梯度其实是个等度,设置这个梯度没意义,可以都删除,直接在AB泵上设置就行了.
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