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跪求高手分析PCR电泳图,右边的是marker,求分析,

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:综合作业 时间:2024/10/06 06:12:56
跪求高手分析PCR电泳图,右边的是marker,求分析,
建议从buffer,退火温度,找问题.
上面纯属臆测,

非特异扩增,和引物,退火温度有很大关系,首先当你确定模板没问题的时候,请考虑一下引物是否特异,当你确定引物模板都没问题的时候,请你确定你的pcr体系中其他试剂是否有问题.最后一切都没问题的情况下,看看是否可以通过改变退火温度来达到目的.归纳为排除法.

还有,出现拖尾严重有几种可能,一引物模板浓度太高,模板一般用50ng/ul,就已经足够,引物一般用10uM的没10ul总体积加入1ul.另一个就是buffer有问题.当然要是你用的是那几种商品的mix就没有buffer这个忧虑了.

总之分析pcr结果的最好放法就是但没有满足你的目的的时候使用排除法直到达到目的,或者永远不能成功