设计引物的时候,我比对氨基酸序列,由于保守性很高,老师让我用核苷酸序列比对.
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:综合作业 时间:2024/07/17 23:01:04
设计引物的时候,我比对氨基酸序列,由于保守性很高,老师让我用核苷酸序列比对.
我比对氨基酸序列,由于保守性及较高,老师让我用核苷酸序列比对.直接用核苷酸序列设计引物,由于核苷酸长度不一,但编码区CDS是差不多.抠出CDS比对,相似性还是比较理想的.CDS是小写的.然后也没对齐.还有数字,跟全长核苷酸序列不一样.我自己整理下格式,前面加个大于号,变成FAST格式.有的软件还不识别.准备手写引物按后用软件打分,哪位朋友有这方面的经验吗?没分了.悲催.求义务帮助.
我比对氨基酸序列,由于保守性及较高,老师让我用核苷酸序列比对.直接用核苷酸序列设计引物,由于核苷酸长度不一,但编码区CDS是差不多.抠出CDS比对,相似性还是比较理想的.CDS是小写的.然后也没对齐.还有数字,跟全长核苷酸序列不一样.我自己整理下格式,前面加个大于号,变成FAST格式.有的软件还不识别.准备手写引物按后用软件打分,哪位朋友有这方面的经验吗?没分了.悲催.求义务帮助.
要设计简并引物是么?最好还是使用CDS序列来做比对,然后根据保守区设计简并引物,CDS两端的非翻译区在物种间变化太大,不适合设计引物.把获得各个物种的CDS做成fasta格式的,序列最好处理成纯序列格式的不含其它任何字符.然后用比对软件比对一下,如mega,DNAman或者是vector NTI里的比对工具都可以做比对.在比对结果里找到非常保守的区域就可以设计简并引物了.设计的简并引物可以根据经验公式自个算Tm值.不用计较打分的问题.因为你只能在保守区设计引物.图是做的DNA序列比对,有保守区和不保守区.我觉得,引物的3'端最好位于最保守的区域.![](http://img.wesiedu.com/upload/9/96/9961bb3778a6210bc7b793823f81c2da.jpg)
![](http://img.wesiedu.com/upload/9/96/9961bb3778a6210bc7b793823f81c2da.jpg)
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