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CTAB法提取DNA,有大量絮状沉淀,电泳DNA带弱,点样孔不亮,不是蛋白,会是多糖吗?怎么办

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/07/05 08:07:01
CTAB法提取DNA,有大量絮状沉淀,电泳DNA带弱,点样孔不亮,不是蛋白,会是多糖吗?怎么办
(1)尽可能采用新鲜无损伤的幼叶,在与提取缓冲液接触前,应防止冰冻的样品在空气中融化,否则酚类易被氧化.同时采用液氮研磨,尽可能磨细、磨匀,且时间不能太长.(2)在加裂解液前,先加入冷冻的提取缓冲液(内含3%的 PVP 及 2%β-巯基乙醇),可除去部分杂质和多糖,且 PVP 可以和多酚类物质结合形成复合物,防止多酚物质氧化成醌类,同时 PVP 能有效去除多糖,从而降低酚类物质以及多糖对 DNA 的影响.(3)适当提高提取缓冲液中SDS(2.5%)的浓度,使 SDS 与糖充分结合,通过高速离心除去.
再问: 忘记说了,我提取的是丝状真菌DNA,测了浓度A260/280 基本都是1.8几,这个值应该还可以,可是A260/230都是0.3左右,说明有大量的杂质,我最为怀疑是多糖
再答: 恩,A260/230小于2.0就表明溶液中有盐和小分子杂质。