引物退火温度是53度,如何设置两个梯度的退火温度

如何利用梯度PCR测定退火温度?怎样测定的? 请教如何计算出兼并引物的退火温度 ISSR-PCR引物的退火温度问题 设计引物的时候上下游引物的退火温度分别是56.9和56摄氏度,PCR时退火温度应选多少度! 如何用PCR技术检测酵母菌?如何选择引物?变性、退火、延伸的温度设置为多少比较合适,Buffer? 上下游引物退火温度分别为47、49℃,如何设置温度梯度PCR最合适 RT-PCR,自己前后引物Tm差7度,前引物63度,后引物58度,退火温度如何设置? 退火温度与引物的TM值有什么联系?为什么退火温度要比TM低5度左右最合适? 为什么做PCR设定引物退火温度时设定的退火温度要比合成引物得到的引物Tm值低几度? tm值与退火温度[求助]我想进行引物的特异性检验,进入primer-blast,怎么设置一些相关参数?我想进行引物的特异 在做RT-PCR时,或者是一般的PCR时,退火温度怎么设置,退火温度和Tm值之间有怎么样的关系? 引物的退火温度如何计算,用tm值减去5度,靠谱不?用1m na+的还是50mmna+?