请问各位朋友,pcr产物条带很淡,是什么原因?有哪些好的改良方法?

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：综合作业时间：2024/07/05 19:48:44

引物、模板没问题的话,就加cycle,多扩几轮,就亮了.（一般pcr酶和buffer是没有问题的,除非你反复冻融或者长时间放置室温）如果上一轮扩出来特异性好的话,可以适当降低退火温度.
多扩了几轮,退火温度也降低了,但是条带仍然很淡,这时候,基本上就是引物和模板的问题了.你要好好看看引物特异性好不好,dimer亮不亮,（自身发夹一般不会有太大影响）；模板的话,要看看GC含量高不高,模板质量好不好.引物不好只能重新设计.模板不好可以加点DMSO（GC含量高）,或者重新提取.差不多就这几个方面吧~
再问：谢谢您这些宝贵意见与建议

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